天府肉羊Akirin基因克

发布时间：2025-04-26 22:04

　　肉产量和肉品质都是家畜肉品生产中重要的经济性状,同时也成为了近些年研究的重要领域。Akirin1基因作为受到MSTN基因负调节的下游基因,参与动物胚胎发育、肌卫星细胞增殖分化和骨骼肌受损修复等生理过程。因此Akirin1基因可能通过参与调节骨骼肌生长发育成为新的提高家畜肉产量的候选基因。研究表明Akirin2基因的单核苷酸多肽性(SNP)与日本黑牛和韩国本地牛的大理石花纹评分显著相关,暗示了Akirin2基因可能通过参与调节肌肉中的大理石花纹成为新的改善家畜肉品质的候选基因。本研究运用RT-PCR结合克隆测序方法获得天府肉羊Akirin1基因和Akirin2基因的全编码区序列。Akirin1基因序列长480bp包括426bp的开放阅读框,编码141个氨基酸,序列提交NCBI得到登录号：KF515991。Akirin1氨基酸序列含有11个磷酸化位点,系统进化树分析表明天府肉羊Akirin1基因氨基酸序列与牛和绵羊的Akirin1基因氨基酸序列具有较高的相似性。Akirin2基因序列长660bp包括579bp的开放阅读框,编码192个氨基酸,序列提交NCBI得到登录号：KF515992。Ak...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
常用词语缩写
1 文献综述
    1.1 Akirin基因研究进展
        1.1.1 Akirin基因的发现
        1.1.2 Akirin基因的结构
        1.1.3 Akirin基因的表达
        1.1.4 Akirin基因的功能
    1.2 本研究的目的与意义
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 试验动物与样品采集
        2.1.2 主要仪器设备
        2.1.3 主要试剂及试剂盒
        2.1.4 主要试剂的配制
    2.2 试验方法
        2.2.1 组织总RNA的提取
        2.2.2 提取RNA质量和浓度检测
        2.2.3 cDNA合成
        2.2.4 引物设计
        2.2.5 Akirin1和Akirin2基因cDNA克隆测序
        2.2.6 荧光定量PCR
        2.2.7 蛋白质免疫杂交(Western Bloting)
        2.2.8 统计分析
3 结果与分析
    3.1 总RNA检测
    3.2 Akirin1和Akirin2基因克隆与序列分析
        3.2.1 Akirin1基因RT-PCR结果
        3.2.2 Akirin1基因克隆产物测序
        3.2.3 Akirinl基因序列比对
        3.2.4 Akirin1进化树的构建
        3.2.5 Akirin1蛋白质理化性质分析
        3.2.6 Akirin2基因RT-PCR结果
        3.2.7 Akirin2基因克隆产物测序
        3.2.8 Akirin2基因序列比对
        3.2.9 Akirin2进化树的构建
        3.2.10 Akirin2蛋白理化性质分析
    3.3 Akirinl和Akirin2基因荧光定量PCR结果
        3.3.1 引物正确性验证
        3.3.2 熔解曲线和标准曲线
        3.3.3 Akirin1和Akirin2基因mRNA表达情况
    3.4 Akirin1和Akirin2蛋白表达差异
        3.4.1 Akirin1蛋白表达差异
        3.4.2 Akirin2蛋白表达差异
4 讨论
    4.1 Akirin1基因生物信息学分析
        4.1.1 Akirin1基因cDNA序列分析
        4.1.2 Akirin1蛋白序列分析
    4.2 Akirin2基因生物信息学分析
        4.2.1 Akirin2基因cDNA序列分析
        4.2.2 Akirin2蛋白序列分析
    4.3 Akirin1和Akirin2基因的mRNA表达分析
        4.3.1 Akirin1基因的mRNA表达分析
        4.3.2 Akirin2基因的mRNA表达分析
    4.4 Akirin1和Akirin2蛋白的表达分析
        4.4.1 Akirin1蛋白表达
        4.4.2 Akirin2蛋白表达
5 结论
参考文献
致谢
攻读硕士期间发表的论文



本文编号：4041435