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猪流感病毒GX18ca株免疫反应特性研究

发布时间:2025-06-04 01:11
  猪流感(swine influenza,SI)的病原通常为正粘病毒科、流感病毒属的A型流感病毒,可引起猪高热、咳嗽和呼吸困难等症状,该病发病率高、病死率低,所以并没有引起人们对猪群免疫的重视。研究发现,猪呼吸道上皮细胞既含有人流感病毒受体又含有禽流感病毒受体,这意味着人流感和禽流感都能传播给猪,而猪流感也能传播给人和禽类。因此,做好猪流感的防护工作对阻止流感病毒的跨种间屏障传播、阻击流感全球范围内大流行、维护公共卫生方面意义重大。目前控制和预防流感流行与传播的主要手段是疫苗接种,市面上使用的疫苗以灭活疫苗为主,灭活疫苗的安全度高,特异性较强,同时存在生产周期长、生产工序复杂、不易产生局部免疫反应等缺点。在免疫学上冷适应减毒流感疫苗要优于灭活疫苗,通过鼻腔途径免疫,可诱导粘膜免疫、体液免疫和细胞免疫反应,产生交叉免疫保护力,对异源病毒的攻击提供有效保护。本实验通过对猪流感病毒EA H1N1亚型GX18ca株在适宜温度和限制温度下EID50的比较,鉴定出具有其冷适应和温度敏感特性;对全基因组测序发现,与亲本野生型毒株相比,GX18ca株共有六个位点发生氨基酸变化,分布在...

【文章页数】:56 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图2-1亲本毒株和冷适应毒株在MDCK细胞上的生长曲线A:SW/GX/18/11毒株生长曲线B:GX18ca毒株生长曲线

图2-1亲本毒株和冷适应毒株在MDCK细胞上的生长曲线A:SW/GX/18/11毒株生长曲线B:GX18ca毒株生长曲线

两株病毒以相同剂量分别接种到MDCK细胞中,接种后,第24h、48h、72h收集细胞上清,测定其在30℃、33℃、37℃、39℃四种不同温度下的TCID50,并利用GraphPadPrism6软件作图绘制生长曲线(图2-1),结果显示,SW/GX/18/11在37℃和....


图2-2亲本毒株和冷适应毒株引起的小鼠体重变化和脏器滴定结果比较A:脏器滴定B:体重变化

图2-2亲本毒株和冷适应毒株引起的小鼠体重变化和脏器滴定结果比较A:脏器滴定B:体重变化

用106EID50/50μL剂量感染小鼠,在攻毒三天后每组剖杀3只小鼠,对鼻甲和肺脏病毒滴定,结果显示,冷适应疫苗株GX18ca感染组的小鼠鼻甲检测不到病毒复制,肺脏中检测到了较低含量的病毒,肺脏中病毒滴度为2.67±0.72Log10EID50/mL,而SW/GX/18/1....


图2-3亲本毒株和冷适应毒株引起的肺脏病理变化结果比较

图2-3亲本毒株和冷适应毒株引起的肺脏病理变化结果比较

为了观察小鼠感染病毒后的肺脏的病变程度,我们采集小鼠肺脏,在4%多聚甲醛中固定,然后做病理切片、HE染色后,镜检结果(图2-3),在野生型病毒SW/GX/18/11攻毒组中,第3天小鼠的肺脏组织病变范围约70%,表现出中度的出血性肺炎(图2-3A);在GX18ca攻毒组中,第3....


图3-3 HA基因进化树

图3-3 HA基因进化树

为了进一步阐明GX18ca与SW/GX/18/11、SW/LN/972/16、SC/1/09的遗传进化关系,对各种H1N1亚型的SIV的HA序列进行比对,绘制遗传进化树。从图3-1HA基因的遗传进化树可以看出,主要分为EAH1N1、CSH1N1两个大的分支。GX18ca与S....



本文编号:4049091

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