外排体介导的微小RNA在猪细胞间的传递及其抗病毒作用

发布时间：2025-05-29 06:23

　　外排体(exoxome)是来源于真核细胞的纳米级小囊泡,含有多种生物活性分子,在细胞间物质和信息交流中发挥重要作用。最近的研究资料显示,外排体也是人和鼠源细胞小干扰RNA (small interfering RNA, siRNA)和微小RNA (microRNA,miRNA)的传递机制之一,但能否在猪等哺乳动物细胞间传递尚无报道。 为了阐明外排体能否在猪源细胞间传递干扰RNA,本研究首先构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)3’非翻译区(UTR)特异性人工miRNA (amiRNA)的重组腺病毒rAd-amiR3UTR-EIRES-GFP和表达对照amiRNA的重组腺病毒rAd-amiRcon-EIRES-GFP。电镜观察结果显示两种重组腺病毒具有典型的腺病毒形态；经PCR检测证明重组病毒基因组含amiRNA表达盒；经RT-PCR检测证明重组腺病毒能感染猪源细胞并表达序列特异性amiRNA。 分别用rAd-amiR3UTR-EIRES-GFP和rAd-amiRcon-...

【文章页数】：51 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1miRNA发生及其作用机制Fig.1miRNAandit'smechanismofactionoccurs

图1miRNA发生及其作用机制Fig.1miRNAandit'smechanismofactionoccurs

图2外排体的形成Fig.2generationofexosomes

泡体与质膜融合，这一循环过程使通过外排体介导、无需细胞一细胞直接接触的跨膜转运成为可能[26\图2)。OK)⑩一卷.瘦r一45—丄 MVB与溶酶体磁合 释放内含物溶_腳1图2外排体的形成Fig.2generationofexosomes2.3外排体与病毒外排体作为细....

图2PRRSV病毒粒子的结构模式图

图2PRRSV病毒粒子的结构模式图Fig.2SchematicrepresentationofthePRRSvirus0RF2?7编码的病毒蛋白有M蛋白、N蛋白、糖基化囊膜蛋白。糖基化囊膜蛋白P2、GP3、GP4、GP5四种，分别是由0RF2、0RF3、0RF....

图1-1同源重组腺病毒构建方法

按AdEasy系统进行重组腺病毒的制备、包装pShuttle-amiR3UTR-GFP和pShuttle-amiRcon-GFP[2](图1-1)，获得重组腺病毒rAd-amiR3UTR-GFP和rAd-amiRcon-GFP。iCon 沉条Encopsidation

本文编号：4048867