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紫锥菊提取物对小鼠免疫和抗沙门氏菌感染能力的影响及其机理研究

发布时间:2025-06-20 03:49
  紫锥菊(Echinacea purpurea)是近年来备受关注的一种安全、高效多功能药用植物,其具有强大的免疫调节活性。巨噬细胞和树突状细胞(dendritic cell, DC)同为机体免疫系统的重要成员,前者具有吞噬、分泌、组织修复、抗原递呈等多种功能,后者为专职抗原提呈细胞并能分泌多种细胞因子,两者均在非特异性免疫(先天性免疫)和特异性免疫(获得性免疫)中有重要作用。Toll样受体(Toll-like receptor, TLR)主要表达于巨噬细胞和DC,该类受体在识别配体后,既能够通过激活炎症因子和I型IFN分泌,启动非特异性免疫反应,又可以通过促进DC成熟并递呈抗原,启动特异性免疫反应。因此,本研究拟先以小鼠为研究材料,探讨紫锥菊提取物(Echinacea purpurea extract, EE)对其机体免疫功能和抗沙门氏菌感染能力的影响,再以小鼠巨噬细胞和DC为研究对象,研究EE对两者免疫功能的影响以及TLR信号通路在此免疫调节活动中的作用,最终结合两方面的研究结果,阐明EE调控小鼠细胞和机体免疫功能以及抗沙门氏菌感染能力的机理。主要研究内容及结果如下: (一)EE对...

【文章页数】:210 页

【学位级别】:博士

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致谢
摘要
Abstract
附表清单
缩写表
第一章 文献综述
    1 紫锥菊研究进展
        1.1 简介
        1.2 生物活性
        1.3 主要活性成分
        1.4 安全性
    2 巨噬细胞研究进展
        2.1 简介
        2.2 表面标志物
        2.3 来源
        2.4 激活方式
        2.5 受体
        2.6 功能
    3 树突状细胞研究进展
        3.1 简介
        3.2 分类
        3.3 表型
        3.4 来源与发育
        3.5 成熟与功能
        3.6 DC与获得性免疫耐受
    4 TLR研究进展
        4.1 简介
        4.2 种类及配体
        4.3 表达与分布
        4.4 结构
        4.5 信号通路
    5 本研究的目的和意义
第二章 紫锥菊提取对小鼠机体免疫功能和抗鼠伤寒沙门氏菌感染能力的影响
    1 试验材料
        1.1 试验药物
        1.2 试验动物
        1.3 试验菌株
        1.4 试剂
        1.5 主要仪器与设备
    2 试验方法
        2.1 ST的培养及准备
        2.2 小鼠分组及给药方式
        2.3 样品的采集和预处理
        2.4 指标测定
        2.5 数据处理
    3 结果与分析
        3.1 EE对正常小鼠和ST感染小鼠体重与存活率的影响
        3.2 EE对正常小鼠和ST感染小鼠肠粘膜结构的影响
        3.3 EE对正常小鼠和ST感染小鼠肠粘膜中性粒细胞浸润的影响
        3.4 EE对ST在小鼠体内定植和移位的影响
        3.5 EE对正常小鼠和ST感染小鼠免疫器官的影响
        3.6 EE对正常小鼠和ST感染小鼠脾脏T细胞亚群、B细胞和巨噬细胞的影响
        3.7 EE对正常小鼠和ST感染小鼠IgG和sIgA分泌的影响
        3.8 EE对正常小鼠和ST感染小鼠炎症细胞因子分泌的影响
        3.9 EE对正常小鼠和ST感染小鼠炎症细胞因子基因表达的影响
        3.10 EE对正常小鼠和ST感染小鼠肠粘膜NO产生的影响
    4 讨论
        4.1 EE对正常小鼠机体免疫功能的影响
        4.2 EE对小鼠抗ST感染能力的影响
    5 小结
第三章 紫锥菊提取物对小鼠巨噬细胞免疫功能的影响
    1 试验材料
        1.1 试验药物
        1.2 试验细胞
        1.3 试验动物
        1.4 试剂
        1.5 主要仪器与设备
    2 试验方法
        2.1 EE对RAW264.7小鼠巨噬细胞系免疫功能的影响
            2.1.1 细胞培养及准备
            2.1.2 EE安全性的评估
            2.1.3 RAW264.7细胞活化的检测
            2.1.4 RAW264.7细胞吞噬功能的检测
            2.1.5 RAW264.7细胞细胞因子和iNOS基因表达的检测
            2.1.6 RAW264.7细胞细胞因子分泌的检测
            2.1.7 RAW264.7细胞NO合成能力的检测
        2.2 EE对小鼠BMDM免疫功能的影响
            2.2.1 细胞分离及培养
            2.2.2 小鼠BMDM的鉴定
            2.2.3 EE细胞毒性的检测
            2.2.4 小鼠BMDM极化的鉴定
            2.2.5 小鼠BMDM活化的检测
            2.2.6 小鼠BMDM吞噬功能的检测
            2.2.7 小鼠BMDM其他细胞因子基因表达的检测
            2.2.8 小鼠BMDM细胞因子分泌的检测
            2.2.9 小鼠BMDM NO合成能力的检测
            2.2.10 小鼠BMDM TLR信号通路的研究
        2.3 数据处理
    3 结果与分析
        3.1 EE对RAW264.7小鼠巨噬细胞系免疫功能的影响
            3.1.1 EE对RAW264.7细胞的安全性
            3.1.2 EE对RAW264.7细胞活化和吞噬功能的影响
            3.1.3 EE对RAW264.7细胞细胞因子和iNOS基因表达的影响
            3.1.4 EE对RAW264.7细胞因子分泌的影响
            3.1.6 EE对RAW264.7细胞NO合成功能的影响
        3.2 EE对小鼠BMDM免疫功能的影响
            3.2.1 小鼠BMDM的鉴定
            3.2.2 EE对小鼠BMDM的安全性
            3.2.3 EE对小鼠BMDM极化的影响
            3.2.4 EE对小鼠BMDM活化的影响
            3.2.5 EE对小鼠BMDM吞噬功能的影响
            3.2.6 EE对小鼠BMDM其他细胞因子基因表达的影响
            3.2.7 EE对小鼠BMDM炎症因子和IFN-β分泌的影响
            3.2.8 EE对小鼠BMDM NO合成功能的影响
            3.2.9 EE对小鼠BMDM TLR信号通路的影响
    4 讨论
    5 小结
第四章 紫锥菊提取物对小鼠树突状细胞免疫功能的影响
    1 试验材料
        1.1 试验药物
        1.2 试验动物
        1.3 试剂
        1.4 主要仪器与设备
    2 试验方法
        2.1 细胞分离及培养
        2.2 小鼠BMDC的鉴定
        2.3 EE细胞毒性的检测
        2.4 BMDC成熟的检测
        2.5 BMDC抗原摄取能力的检测
        2.6 BMDC细胞因子基因表达的检测
        2.7 BMDC细胞因子分泌的检测
        2.8 BMDC TLR信号通路的研究
        2.9 数据处理
    3 结果与分析
        3.1 小鼠BMDC的鉴定
        3.2 EE对小鼠BMDC的安全性
        3.3 EE对小鼠BMDC成熟的影响
        3.4 EE对小鼠BMDC抗原摄取能力的影响
        3.5 EE对小鼠BMDC细胞因子基因表达的影响
        3.6 EE对小鼠BMDC细胞因子分泌的影响
        3.7 EE对小鼠BMDC TLR信号通路的影响
    4 讨论
    5 小结
第五章 结论、创新点和研究展望
参考文献
附录:毕业论文相关实验操作
作者简历及在学期间所取得的科研成果



本文编号:4051378

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