禽腺病毒4型核酸疫苗的构建及免疫效果初步评价

发布时间：2025-06-19 05:43

　　禽腺病毒是一种对家禽危害极大的病原体,其中血清4型禽腺病毒(FAdV-4)主要引起禽的心包积水-包涵体肝炎综合征。该病发病快、死亡率高,目前预防该病主要靠灭活苗和弱毒苗,但是这两种疫苗存在很多的缺点,所以研发一种安全、高效的新型核酸疫苗对该病的防控很有帮助。本研究对其结构蛋白Hexon和Penton进行了串联,分别进行了原核表达和真核表达,获得了Hexon-Penton串联蛋白,对其免疫效果进行了初步研究,其结果如下:1.禽腺病毒血清4型Hexon-Penton串联蛋白的原核表达及多抗制备本研究根据NCBI GenBank中公布的Hexon基因和Penton基因序列设计引物,克隆出Hexon基因和Penton基因并串联,得到Hexon-Penton(HP)串联基因,将HP基因导入表达载体pET32a(+),获得重组质粒pET32a-HP,将其转化表达菌株BL21经IPTG诱导表达,得到分子质量约为108kDa的HP原核蛋白,HP原核蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠制备多抗血清,说明HP原核蛋白具有良好的免疫原性,为进一步建立FAdV-4的血清学检测方法奠定了基础。2.禽腺病毒血清4型Hex...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2-1Hexon、Penton与HP基因的扩增Fig2-1TheamplificationofHP

图2-1Hexon、Penton与HP基因的扩Fig2-1TheamplificationofHPaker；1：Hexon基因；2：Penton基因：TheHexongene；2：ThePentongenET32a-HP的构建amHI和Xh....

图2-2重组质粒的鉴定Fig.2-2Identificationoftherecombinantplasmids

图2-1Hexon、Penton与HP基因的扩增Fig2-1TheamplificationofHPaker；1：Hexon基因；2：Penton基因：TheHexongene；2：ThePentongenET32a-HP的构建amHI和X....

图2-3HP蛋白的表达与鉴定Fig.2-3TheexpressionandidentificationofHPproteinA：HP原核表达；M：预染蛋白Maker；1：HP蛋白；2：空载体对照

第二章禽腺病毒血清4型Hexon-Penton串联蛋白的原核表达导表达，同时设pET32a空载体对照组，诱导5h后离心收集BS洗涤三次后加入适量PBS重悬菌体，制成蛋白样品。进E，取出凝胶经过考马斯亮蓝染色和脱色液脱色，结果如图a处出现目的条带，而空载....

图2-4HP蛋白的可溶性分析与纯化

图2-4HP蛋白的可溶性分析与纯化Fig.2-4ThesolubilityanalysisandpurificationofHPproteinA：HP蛋白的可溶性分析；M：预染蛋白Maker；1：全菌；2：沉淀；3：上清B：包涵体蛋白纯化；M：预染蛋白....

本文编号：4050944