绵羊乳腺金黄色葡萄球菌感染后血常规及外周血细胞因子的变化规律

发布时间：2025-06-20 05:48

　　 【目的】为探讨绵羊乳腺金黄色葡萄球菌感染后血常规及其外周血细胞因子表达变化规律.【方法】选择健康泌乳期小尾寒羊5只,分别从乳头灌注金黄色葡萄球菌菌液0.5 mL(3×10³ cfu/mL),在灌注前0 h及灌注后12、24、36、48、72、96 h经绵羊颈静脉采集血液,用动物血球分析仪测定血常规,同时运用qRT-PCR方法检测外周血细胞因子（IFN-α、IL-1β、IL-16和TNF-α）mRNA的相对表达量,用ELISA方法检测血清中细胞因子（IFN-α、IL-1β、IL-16和TNF-α）的浓度.【结果】外周血白细胞、淋巴细胞和单核细胞总数在绵羊乳腺金黄色葡萄球菌感染后24 h显著低于感染前,48 h时表现出上升趋势;金黄色葡萄球菌感染后12、24 h,IFN-α、IL-1β、IL-16及TNF-α的mRNA表达量显著或极显著升高,感染后36 h各细胞因子mRNA表达量均达到峰值,48 h时表现出下降趋势;血清中IFN-α、IL-1β、IL-16及TNF-α浓度于感染后12 h或24 h显著升高,感染后24 h或36 h达到峰值,感染后48 h时各细胞因子浓...

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【部分图文】：

图1 细胞因子及β-actin PCR扩增产物

将反转录好的cDNA作为模板,TNF-α、IFN-α、IL-16及IL-1β和内参基因β-actin为特异性引物进行扩增,PCR产物进行1.5%琼脂糖凝胶电泳检测,分别在预期分子量处出现强弱不同的电泳条带,如图1所示.2.3实时荧光定量PCR产物的特异性

图2 CKs基因SYBR Green I Real-time PCR 扩增产物的熔解曲线

qRT-PCR扩增结果显示本试验设计的特异引物扩增效果良好,溶解曲线只有一个特异性峰出现,说明扩增过程中无引物二聚体和非特异性产物出现(图2).2.4CKs基因mRNA的相对表达量检测结果

图3 金黄色葡萄球菌感染后血清中CKs基因mRNA

由图4可知,在感染金黄色葡萄球菌12h后,绵羊血清中的IL-1β和IL-16的浓度开始显著上升,感染24h后血清中IFN-α和IL-16的浓度显著高于0h,IL-1β极显著高于0h;IFN-α和IL-16浓度在感染24h后达到峰值,IL-1β和TNF-α于感染后36h....

图4 感染金黄色葡萄球菌后血清中CKs的浓度

图3金黄色葡萄球菌感染后血清中CKs基因mRNA

本文编号：4051520