毛囊皮质部特异表达绵羊KAP13-1转基因小鼠的鉴定

发布时间：2025-07-03 03:43

　　羊毛品质主要由羊毛纤维的特性决定,羊毛纤维由角质层、皮质和髓质组成,其中皮质部表达的基因对羊毛纤维的性状有重要影响,KAP13-1基因在绵羊毛囊皮质部表达,且影响毛纤维的细度。本课题组在前期研究中构建了具有在毛囊皮质部特异表达的绵羊KAP11-1启动子并制备了毛囊皮质部特异表达绵羊KAP13-1和绿荧光蛋白ZSG的转基因小鼠,命名为pKAP11-1-sKAP13-1-2A-ZSG-Plus（简称Plus小鼠）,初步鉴定发现Plus小鼠的毛纤维细度与野生型相比变细了。本研究在此基础上对Plus小鼠进行了三个世代（G2-G4代）的传代交配,首先分析Plus小鼠外源基因遗传和表达的稳定性,并对Plus小鼠毛囊表型进行检测,最后通过生物信息学预测、EMSA、免疫荧光等技术鉴定能够与KAP11-1启动子结合的转录因子,并在不同的绵羊群体中对转录因子NFAT5进行了SNP筛选。主要的研究结果如下:1、Plus小鼠外源基因表达的稳定性检测（1）利用基因组步移技术鉴定发现Plus小鼠外源基因插入在小鼠17号染色体Ermard基因和delta-like protein 1 precursor基因之间的基因...

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图1-1毛囊结构示意图（Xinetal2018）

毛囊皮质部特异表达绵羊KAP13-1转基因小鼠的鉴定外根鞘（ORS）、伴侣层（companionlayer）、内根鞘和鞘小皮、毛干（hairshaft）（PausandFoitzik2004,F可分为上下两个部分，上半部分可分为漏斗部（infun，漏斗部的末端与峡....

图1-2毛囊的形态发生和结构（DuvergerandMorasso2009）

图1-2毛囊的形态发生和结构（DuvergerandMorasso2009）Fig1-2Hairfolliclemorphogenesisandstructure(DuvergerandMorasso2009)毛囊的诱导和形成过程受真皮细胞和表皮干细胞....

图3-1Plus小鼠GenomeWalkingA：5’侧翼序列扩增；B：3侧翼序列扩增；1、2、3分别为第一次巢式PCR、第二次巢式PCR、第三次巢

3结果3.1Plus小鼠遗传稳定性鉴定3.1.1Plus小鼠外源基因插入位点鉴定本实验室前期已经成功构建了pKAP11-1-sKAP13-1-2A-ZSG-Plus转基因小鼠（简称Plus小鼠）并确证了毛发具有绿荧光的Plus小鼠为转KAP13-1基因阳....

图3-2外源基因sKAP13-1-2A-ZSG序列插入位置示意图

华中农业大学2019届硕士研究生学位（毕业）论文司测序。将测序结果与小鼠的基因组序列进行比对，确定Plus小鼠外源基因sKAP13-1-2A-ZSG在小鼠基因组上的插入的位置。比对结果发现外源基因sKAP13-1-2A-ZSG有两处插入位点，分别在17号染色体E....

本文编号：4055716