牛病毒性腹泻病毒单克隆抗体的制备与双抗夹心ELISA方法的建立

发布时间：2025-07-07 04:56

　　牛病毒性腹泻(Bovine viral diarrhea,BVD)又称为粘膜病(Mucosal disease,MD),是由牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)引起,临床症状主要为精神沉郁、流涎、产奶量下降甚至停奶、腹泻和结膜炎等,孕牛出现流产、产出畸形胎儿或产出持续感染(PI)牛,新生犊牛因严重腹泻而死亡。PI牛一生持续带毒并不断持续向外界排毒,是BVDV最主要的传染源。牛病毒性腹泻流行范围广,给全球养牛业造成了巨大的损失。BVDV的E0蛋白是最保守的结构蛋白之一,能被分泌到细胞外,样品不用做任何处理就能用抗原捕获ELISA(ACE-ELISA)检测,具有重要的诊断价值;E2是BVDV的主要保护性抗原;p80蛋白结构保守,针对p80的单抗能区分出动物是疫苗免疫还是自然感染的,可以用于鉴别诊断,有利于BVDV的净化。目前国外开发的抗原捕获ELISA(ACE)具有良好的敏感性、特异性和可重复性,可以用于检测BVDV的抗原,是一种操作简单且经济的可以检测PI牛的方法。目前我国尚缺乏可用的特异性良好的针对BVDV的p80、E0及E2蛋白的单克隆抗...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2.1BVDV纯化后电镜结果

1:8依次倍比稀释至1:1024，每个稀释度稀l的含100TCID50/100μl的病毒稀释液，混匀细胞培养板板中，100μl/孔，每个稀释度做培养，每天观察细胞变化。异性检测V3、IBRV包被ELISA板，将单克隆抗体按1:鉴定单抗的特异性。瘟病毒交叉反应的....

图2.2病毒纯化前后的TCID50测定结果

学位论文第二章牛病毒性腹泻病BVDV病毒粒子负染后，经透射电镜观察可看到完整的带粒子直径为40nm-60nm左右，与纯化前的电镜观察对比，该....

图2.3病毒纯化前后SDS-PAGE结果

硕士学位论文第二章牛病毒性腹泻病毒单表2.1病毒纯化前后IDEXX试剂盒测定结果Table2.1Determinationofvir....

图2.4单克隆抗体与接种VEDEVAC毒株的细胞的IFA鉴定结果

GHI图2.4单克隆抗体与接种VEDEVAC毒株的细胞的IFA鉴定结果Figure2.4IFAidentificationresultsofmonoclonalantibodiesandVEDEVACinoculatedcells注：A、B、....

本文编号：4056534