SKAP2-Arp2/3-Actin信号通路在小鼠卵母细胞减数分裂过程中的作用

发布时间：2025-06-24 06:55

　　SKAP2,也称SFK家族激酶相关磷酸化蛋白2,是非受体蛋白酪氨酸激酶家族中的一员。有研究报道SKAP2参与调控细胞微丝组装的一系列重要过程,但SKAP2在卵母细胞成熟过程中的作用机制仍未阐明。本实验以小鼠卵母细胞为研究对象,探讨了 SKAP2在细胞不对称减数分裂过程中的表达、定位和相关调控机制。前期结果表明:在减数分裂GV、GVBD、MI和MII期,SKAP2均有稳定表达。通过对处于减数分裂各个关键时期的卵母细胞进行免疫荧光染色实验,我们发现SKAP2主要定位在卵母细胞皮质边缘。细胞松弛素B的干扰处理进一步证实了 SKAP2与微丝在卵母细胞皮质呈现共定位关系。为了进一步探究SKAP2与微丝之间的关系和作用机制,我们通过对卵母细胞显微注射特异性SKAP2 siRNA来降低SKAP2蛋白的表达水平。结果显示SKAP2下调引起卵母细胞第一极体排放率下降和胞质分裂失败。细胞膜和细胞质中的微丝组装量在下调SKAP2后也降低了。同时敲低SKAP2表达水平还干扰了纺锤体迁移、微丝帽和无皮质颗粒区的形成,并且影响大多数卵母细胞减数分裂周期。与此同时,ARP2和WAVE2的表达和定位在SKAP2下调后也...

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【部分图文】：

图１．１卵母细胞减数分裂过程示意图｜Ｕ｜

分裂形成单倍体配子，真正实现了染色体数目倍性减半。因此保证了卵母细??胞正常受精和母源遗传物质的稳定［４］。??卵母细胞减数分裂关键时期如图１所示，其间涉及卵母细胞ＤＮＡ、染色体、??细胞核、细胞骨架的变化详细情况为：??①

图１．２微丝成核和延长示意图｜２７１

?在微丝延长过程上，ｆｏｒｍｉｎ蛋白和Ａｒｐ２／３复合体不同，同时ｆｏｒｍｉｎ蛋白始终与微??丝正极端结合，不会产生分支（图１．２）。??Ａｆｐ２／３?Ａｒｐ２／３?Ｎｕｄｅａｔｉｏｎ??＋?ＮＰＦＳ?ｃｏｍｐｌｅＫ?Ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ?Ｆａｃｔｏｒ?ｆ、??＃?ｗ??Ｒｒｏｆｉ....

图１．３减数第一次分裂中期纺锤体迁移和细胞皮质极化｜４４’４５１

当纺锤体迁移到细胞皮质后，皮质极性形成。细胞皮质极化的典型特征还包??括在微帽区域聚集的Ｒａｃ－ＧＴＰ、Ｍｙｏｓｉｎ?ＩＩ和Ｃｄｃ４２以及微丝帽的下方无皮质颗??粒区形成［３５，３６］（图１．３）。相关研究报道，这些迁移到皮质的染色质介导皮质重??组启动，实验中微丝帽的形成用ＤＮ....

图１．４减数第一次分裂中期纺键体示意图｜Ｓ１｜〇Ｆｉｇｕｒｅｌ．４?Ｓｐｉｎｄｌｅ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｍｅｔａｐｈａｓｅ??ｏｆ?ｏｏｃｙｔｅ?ｍｅｉｏｓｉｓ?Ｉ丨??

?Ｖｅｓｉｃｌｅｓ??Ｐｈｏｓｐｈｏ－ｉｎｙｏｓｉｎ－ＩＩ??图１．３减数第一次分裂中期纺锤体迁移和细胞皮质极化｜４４’４５１。Ｆｌｇｕｒｅｌ．３?Ｓｐｉｎｄｌｅ??ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ｉｎ?ｍｅｔａｐｈａｓｅ?ｏｆ?ｏｏｃｙｔｅ?ｍｅｉｏｓｉｓ?Ｉ?ａｎｄ?ｃｏｒｔｉｃａｌ?ｐ....

本文编号：4052647