蛋白质泛素化和泛素E3连接酶Itch在骨折愈合中的作用

发布时间：2022-01-27 23:55

　　本课题通过实时定量PCR（qPCR）、Western blot以及染色质免疫沉淀（Ch Ip）等实验方法,对泛素E3连接酶Itch在骨折修复过程中的作用进行相关研究。制作小鼠胫骨骨折模型是试验中重要的一环:通过腹腔注射适量的氯胺酮和甲苯噻嗪对小鼠进行麻醉;在确认麻醉诱导生效后,将左膝和小腿的毛剃除干净充分备皮;使用聚维酮碘溶液对术区进行消毒;使用无菌手术刀在小鼠胫骨前侧皮肤上做长约6mm的纵行切口,同时将其膝关节尽可能弯曲到约120度;将无菌的27G针头通过胫骨内、外侧髁之间的髌韧带插入胫骨髓腔中,并确认针的尖端到达髓腔的末端;将针头临时向后稍拔出,以便于使用Dremel 7700电磨钻横断胫骨;然后将针重新插入胫骨髓腔将骨折固定复位;切口用5-0缝线妥善缝合;当小鼠仍处于麻醉状态时进行X线成像以确认针头放置。在骨折术后第3、7、10、14和21使用TRIzol试剂从骨痂组织提取总RNA。使用i SCRIPT c DNA合成试剂盒合成c DNA。在i Cycler实时PCR仪中使用i Q SYBR Green Supermix根据制造商的说明进行实时定量RT-PCR扩增。在相同的平板上... 

【文章来源】：吉林大学吉林省211工程院校985工程院校教育部直属院校

【文章页数】：93 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

HECT连接酶

HECT域的结构特征

图 1.3 Nedd4 家族和其他 HECT E3 连接酶对底物的调控SMURF1 对 BMP 信号组件 SMAD1 和 SMAD5 靶向降解[40]，尽管在小鼠中


本文编号：3613307