人精子膜Cl～-通道的特性和男性抗生育药对Ca～(2+)通道的作用

发布时间：2025-05-01 11:25

　　哺乳动物精子膜离子通道对精子的成熟、获能和顶体反应(acrosome reaction, AR)有重要作用，已有的资料表明，当精子所在环境中缺乏Cl-或Cl-通道阻断剂存在时，AR受到抑制。但由于精子太小以及它特殊的立体结构和高度分化特点，目前还难以用膜片箝技术直接记录人精子膜离子通道电流，从而获得有关人精子膜Cl-道类别及电生理特性的基本资料。本文报告，将抽提的人精子膜蛋白重组于脂质体脂双层膜，并进而通过脱水-复水法使之融合成可用于膜片箝研究的巨脂质体(直径>10 (m)，在NMDG-Cl溶液中记录到三种不同单位电导的通道活动。它们都可被Cl-通道阻断剂SITS浓度依赖地抑制。研究还表明，它们的开放有一定的电压依赖性；对其开放、关闭时间分布进行拟合，可得到两个开放和两个关闭时间常数；还观察到电导亚态和簇状发放的存在。 近来的研究发现，某些中药成份具雄性抗生育作用。其中以棉酚(gossypol)和雷公藤(Tripterygium wilfordii)为代表，已受到人们的广泛关注，目前已从雷公藤中分离出多种具雄性抗生育作用的单体成份。但关于这些药物对通道影响方面的研...

【文章页数】：72 页

【学位级别】：博士

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缩略词表
中英文摘要
第一部分 重组于巨脂质体的人精子膜Cl^-通道的膜片箝研究
    1. 引言
    2. 材料与方法
        2.1 人精子膜蛋白样本
        2.2 通道蛋白重装于巨脂质体
        2.3 隔离巨脂质体膜片，记录单通道电流活动
        2.4 结果分析
        2.5 溶液和试剂
    3. 结果
        3.1 单位电导
        3.2 通道活动被Cl^-通道阻断剂抑制
        3.3 通道的电压依赖性
        3.4 通道开放、关闭时间常数
        3.5 通道的电导亚态和簇状活动
    4. 讨论
    5. 参考文献
第二部分 雄性抗生育中药对小鼠生精细胞Ca²⁺通道的抑制
    1. 引言
    2. 材料与方法
        2.1 生精细胞的分离
        2.2 精子的分离与收集
        2.3 通道电流的记录
        2.4 精子AR的评价
        2.5 结果分析
        2.6 溶液与药品
    3. 结果
        3.1 棉酚对小鼠生精细胞离子通道的作用
            3.1.1 时间依赖性、浓度依赖性和不可逆地抑制Ca2+流
            3.1.2 浓度依赖地增大通道的失活时间常数
            3.1.3 棉酚对T型Ca2+电流的抑制与G蛋白、酪氨酸激酶无关
            3.1.4 对Cl-通道电流无明显作用
        3.2 雷公藤总甙及其中的三种单体，TZ、L-表儿茶酸、南蛇藤素对小鼠生精细胞T型Ca2+通道的抑制，以及TZ对精子AR的抑制
            3.2.1 GTW浓度依赖、部分可逆地抑制Ca²⁺流
            3.2.2 TZ在相近浓度浓度依赖、部分可逆地抑制Ca2+流
            3.2.3 L-表儿茶酸在较高浓度浓度依赖、部分可逆地抑制Ca2+流
            3.2.4 南蛇藤素浓度依赖、时间依赖地抑制Ca²⁺流
            3.2.5 TZ浓度依赖地抑制精子AR
    4. 讨论
        4.1 棉酚抑制生精细胞T型Ca²⁺通道
        4.2 GTW及其单体抑制生精细胞T型Ca²⁺通道，以及TZ抑制精子AR
    5. 参考文献
全文总结
附录:综述
    在读期间发表论文、综述和摘要
致谢



本文编号：4042198