HUVECs海藻酸盐水凝胶封装保存及其抑冰机制研究

发布时间：2025-07-09 04:54

　　低温保存是实现细胞、组织以及器官长期存储的主要方法,成功的低温保存对于生殖医学,干细胞研究,脐带血储存和相关的生物医学研究至关重要。然而,在慢速冷冻保存的降温过程中细胞易遭受溶质损伤和冰晶损伤,而在玻璃化保存的复温过程中细胞易受到反玻璃化形成的胞内冰损伤。为此,研究保存过程中的胞内冰形成机制与提出相对应的解决方法是十分有必要的。本文首先研究了PIECs在有无保护剂时的胞内冰形成概率,并拟合得到了不同降温速率下的细胞成核相关参数,反应了保护剂和降温速率对胞内冰形成的影响。现有的研究中胞内冰的形成机制有三种不同的假设,目前最常用的假设是催化成核假设,在这假设的基础上研究学者提出了相应的胞内冰形成概率的理论模型,本文就是在该模型的基础上开展的。其次,本文采用了静电喷雾的方法生成具有核壳结构的海藻酸盐水凝胶用于封装保存人脐带静脉内皮细胞。现有的研究表明海藻酸盐水凝胶可以抑制保存过程中冰晶的出现与生长,可以用于封装保存细胞。我们的实验结果表明,核壳结构的微胶囊可以在较低浓度保护剂条件下(～3 mol/L)实现较高质量的细胞保存。同时,海藻酸盐胶囊的低温冷台实验表明,海藻酸盐胶囊在冷冻复温过程中其体...

【文章页数】：92 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．３降温速率对４种细胞冷冻后存活率的影响［９］??２??

不同的：在用低温保护剂（例如甘油或二甲基亚砜（ＤＭＳＯ））处理后，许多哺??乳动物细胞通常以约１?°Ｃ／ｍｉｎ冷却时效果最好，但是这一速度并不是普遍性最??优的［９］。图１．３呈现了降温速率对不同细胞存活率的影响，由图可以看出降温??速率对保存结果的影响非常大，不同细胞的最佳降温....

图１．４非平衡慢速冷冻，平衡慢速冷冻，非平衡玻璃化和平衡玻璃化过程中胚胎（圆圈）??的示意图

要是由于降温速率的不同造成的，但是除此之外，所用的保护剂浓度以及降／??复温过程中的冰晶形成情况都存在很大的差异性，表１．１所示总结了两种方法??的差异性，而图１．４则展示了利用两种不同的方法保存卵细胞的过程。为了进??一步理解两种方法的不同，接下来将详细介绍两种方法的特性和应用....

图１．５渗透性与非滲透保护剂各自的特点??表１．２几种常用的低温保护剂及其各自的应用［７９］??

??是在慢速冷却期间细胞脱水导致其细胞内部被高浓度盐包围的时候［７８］。图１．５??和表１．２分别展示了两种类型保护剂各自的特点和几种常用的低温保护剂及其??应用。??Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｎｇ?ＣＰＡ?Ｎｏｎ－ｐｅｎｅｔｒａｔｉｎｇ?ＣＰＡ??丨丨．丨１－．丨…?川丨＂ｉｌ．．．．....

图１．６细胞在低温保存过程中的可能出现的细胞损伤Ｐ９］??１１??

到生理温度后也会恢复相应的细胞功能［８１］。因此，细胞的低温保存己成为目??前广泛用于活细胞和供体组织长期储存的方法。目前来说低温保存技术己经相??对成熟。然而，在低温保存过程中细胞仍存在损伤（图１．６呈现了保存过程中??的不同降温速率下的主要现象以及可能出现的损伤），例如降温过....

本文编号：4057189