雷帕霉素对实验性视网膜脱离后光感受器细胞死亡作用及其机制研究

发布时间：2022-12-05 21:47

　　目的:实验性视网膜脱离后,应用caspase酶抑制剂z-VAD-FMK虽然可以抑制细胞凋亡,但增加RIP-1介导的坏死性凋亡。本实验探讨实验性视网膜脱离后,雷帕霉素干预的自噬激活能否抑制坏死性凋亡以及雷帕霉素联合z-VAD-FMK对视网膜是否具有保护作用。方法:健康雄性SD大鼠随机分为无网脱组（Attached）、网脱组（Untreated）、zVAD-FMK组,z-VAD-FMK+雷帕霉素（RAPA）组。通过视网膜下注入透明质酸钠和DMSO构建网脱模型。z-VAD-FMK及雷帕霉素在构建网脱模型的同时于网膜下注射。利用蛋白质免疫印迹法（western blot）测出RIP-1、beclin-1、LC3、AIF蛋白表达情况,通过D02 ROS探针的荧光强度检测各组内视网膜活性氧（ROS）表达情况,苏木素—伊红（HE）染色及电子显微镜观察视网膜厚度及光感受器细胞死亡情况,改良水迷宫实验测试干预后的大鼠行为学改变。结果:成功构建视网膜脱离模型,z-VAD-FMK+RAPA组beclin-1、LC3表达增加,自噬激活。电子显微镜结果显示z-VAD-FMK+RAPA组光感受器细胞的坏死较unt... 

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
前言
材料(资料、内容)与方法
    1.材料与仪器
        1.1 动物
        1.2 大鼠饲料
        1.3 试剂和仪器
        1.4 主要试剂的配置
    2.实验方法
        2.1 视网膜脱离模型的构建及分组
        2.2 透射电镜操作步骤
        2.3 苏木精-伊红染色(H&E)
        2.4 免疫印迹法检测相关蛋白的表达
        2.5 ROS检测
        2.6 水迷宫实验
        2.7 统计学
结果
    1.雷帕霉素干预后自噬激活
    2.z-vad-fmk联合雷帕霉素对视网膜组织结构和形态有保护作用
    3.z-vad-fmk和雷帕霉素干预可以减少光感受器细胞的坏死
    4.雷帕霉素诱导的自噬激活通过抑制ROS及 AIF进而抑制坏死性凋亡
    5.自噬激活后对大鼠的视行为有明显的改善24讨论
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
附录
作者简介及读研期间主要科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Activation of autophagy in photoreceptor necroptosis after experimental retinal detachment[J]. Kai Dong,Zi-Cheng Zhu,Feng-Hua Wang,Gen-Jie Ke,Zhang Yu,Xun Xu.  International Journal of Ophthalmology. 2014(05)
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[3]视网膜脱离后光感受器细胞死亡规律的实验研究[J]. 董凯,柯根杰,武立云,朱子诚,许迅,孙晓东.  眼科新进展. 2014(02)
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[5]兔视网膜脱离后出现神经感觉层细胞凋亡[J]. 王志玉,李玉娟,史爱云.  国际眼科杂志. 2010(03)
[6]实验性网脱复位后未脱离区域视网膜组织形态学观察[J]. 王卉芳,张妍春,朱赛林,杨新光,雷春灵,毕春潮.  陕西医学杂志. 2006(08)
[7]小鼠实验性视网膜脱离后光感受器细胞的凋亡[J]. 杨柳.  中华眼底病杂志. 2006(02)
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本文编号：3710411