HBV RNase H结构域区氨基酸变异对HBV复制影响的初步研究

发布时间：2025-05-26 23:25

　　第一部分HBV RNase H活性位点氨基酸变异对HBV复制的影响 摘要目的:探讨HBV RNase H结构域区活性位点关键氨基酸及其变异对病毒复制的影响。方法:采用计算机软件对HBV (adw2), DHBV、Heron HBV(苍鹭HBV)和WHV(土拨鼠HBV)四种病毒的RNase H区域的氨基酸序列进行比较,并参考HIV、大肠杆菌RNase H活性位点D-E-D-D motif结构,采用Mega-PCR (Mega-primer PCR,大引物法PCR)将HBV (adw2) RNase H序列第D702、H728、E731和D790位氨基酸定向突变,构建了D702A、H728V、E731A和D790A 4个RNase H突变体的表达质粒。将构建的RNase H突变体、阳性对照D750V(RNase H功能缺陷)、阴性对照pCMV-HBV-LE-(RNase H功能正常)表达质粒分别转染Huh7细胞,转染后第5天从细胞胞浆中回收病毒颗粒、提取病毒核酸。为明确病毒颗粒中核酸组分,各样本取2等份,其中一份加RNase H(来自于大肠杆菌),另一份不加RNase H,进行体外消...

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【学位级别】：博士

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前言
第一部分 HBV RNase H 活性位点氨基酸变异对病毒复制的影响
    引言
    材料和方法
    结果
    讨论
    参考文献
第二部分 HBV RNase H 引物套区氨基酸变异对病毒复制的影响
    引言
    材料和方法
    结果
    讨论
    参考文献
第三部分 HCV 准种差异性与早期病毒学应答关系的研究
    中文摘要
    英文摘要
    引言
    材料和方法
    结果
    讨论
    参考文献
综述
    参考文献
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本文编号：4047141