微小RNA-195调控转化生长因子-β/Smad信号通路影响肝纤维化机制研究

发布时间：2025-05-28 05:48

　　 目的研究微小RNA-195（miR-195）调节转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导的大鼠肝星状细胞（HSC-T6）活化与Smad7表达的关系。方法体外培养HSC-T6,用5 ng·mL^-1TGF-β1作为刺激因子,模拟大鼠肝纤维化模型。将细胞分为6组:对照组、模型组（TGF-β1组）、miR-195 mimic实验组、miR-195 mimic NC实验组、miR-195 inhibitor实验组及miR-195 inhibitor NC实验组。分别用5 ng·mL^-1TGF-β1处理HSC-T6细胞24,48,72 h后,以实时荧光定量PCR法检测miR-195、Smad7及α-SMA mRNA表达,以免疫印迹法检测Smad7蛋白表达。结果在TGF-β1诱导下,miR-195的表达随时间逐渐升高、α-SMA表达逐步上调而Smad7表达呈降低趋势,差异均有统计学意义（P<0.01,P<0.01;P<0.05）。与模型组比较,miR-195 mimic能促进TGF-β1诱导的HSC-T6活化,升高miR-195、α-SMA...

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【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
    2 实验方法
        2.1 细胞培养[3]
        2.2 细胞分组与处置
        2.3 细胞瞬时转染[5]
        2.4 用实时荧光定量PCR (Real-time PCR) 法测定mRNA[5]
        2.5 以免疫印迹法测定蛋白表达水平[5]
    3 统计分析
结果
    1TGF-β1对HSC-T6中miR-195、Smad7及α-SMA mRNA表达的影响
    2瞬时转染miR-195 mimic及inhibitor对TGF-β1诱导的miR-195、Smad7及α-SMAmRNA表达变化的影响
    3 转染miR-195 mimic及inhibitor对TGF-β1诱导的Smad7蛋白表达变化的影响
讨论



本文编号：4048169