COL11A1和COL18A1基因与近视相关性分析及近视易感基因SNTB1相关功能研究

发布时间：2025-05-01 10:43

　　目的:由于COL11A1和COL18A1基因的致病突变通常会导致包含有高度近视症状的综合征,所以本论文拟研究COL11A1和COL18A1基因上的5个单核苷酸多态性位点(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)位点(rs17127311,rs11911327,rs2236454,rs2236457,rs2236475)与中国汉族人群高度近视易感性之间的关系。而SNTB1基因作为近视易感基因,对其相关的研究和报道均比较少,所以本实验拟进行近视易感基因SNTB1的相关功能研究,以便为高度近视的有效防治提供理论依据和可能的干预靶点。研究方法:对于COL11A1和COL18A1基因的研究,本实验收集869例高度近视患者和804名正常者(均为中国汉族人群)的外周血标本,并提取相应的标本DNA。根据5个SNP位点相应序列设计上、下游引物和Snapshot引物,DNA扩增方法采用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)扩增进行,同时采用ABI-Snapshot技术对PCR产物进行进一步延伸,然后置于DNA测序仪上检测其基因型。对检测的结果...

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 近视概论
    1.2 高度近视的分子遗传学研究
        1.2.1 连锁分析
        1.2.2 关联分析
    1.3 高度近视疾病基因国内外研究进展
    1.4 近视的遗传因素和环境因素
    1.5 单核苷酸多态性简介
        1.5.1 单核苷酸多态性概念
        1.5.2 常见的的SNPs分析方法
        1.5.3 遗传标记的演化
    1.6 COL1A1和COL18A1基因以及SNTB1基因的前期研究
        1.6.1 COL1A1和COL18A1基因在近视中的前期研究
        1.6.2 SNTB1基因在近视中的前期研究
    1.7 本论文的主要内容
        1.7.1 COL11A1和COL18A1基因多态位点与近视相关性分析
        1.7.2 近视易感基因SNTB1的相关功能研究
    1.8 以期完成的实验目的
    1.9 本实验的结构安排
第二章 材料和方法
    2.1 实验试剂和仪器
        2.1.1 实验试剂
        2.1.2 实验仪器
        2.1.3 实验试剂的配制
    2.2 实验对象和主要生物材料
        2.2.1 COL11A1和COL18A1基因与近视相关性分析实验对象
        2.2.2 近视易感基因SNTB1的相关功能研究的主要生物材料
    2.3 COL11A1和COL18A1基因与近视相关性分析的实验方法
        2.3.1 实验对象的眼科检查
        2.3.2 全血DNA样本提取
        2.3.3 SNP位点的筛选和引物设计
        2.3.4 基因分型
        2.3.5 统计学分析方法
    2.4 SNTB1基因功能研究中质粒的扩增
        2.4.1 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备与转化
        2.4.2 质粒提取
    2.5 SNTB1基因功能研究中293T细胞和3T3细胞的培养
    2.6 CCK8法分析SNTB1基因对3T3细胞和293T细胞增殖的影响
        2.6.1 制作标准曲线
        2.6.2 细胞增殖实验
    2.7 SNTB1基因功能研究中细胞迁移实验
        2.7.1 实验用鼠尾胶原制备
        2.7.2 Transwell检测细胞迁移
    2.8 SNTB1基因功能研究中细胞粘附实验
        2.8.1 Matrigel检测细胞粘附
第三章 结果
    3.1 COL11A1和COL18A1基因与近视相关性分析实验结果
        3.1.1 研究对象临床资料
        3.1.2 GeneticAnalyzer软件基因分型结果
        3.1.3 Sanger直接测序法验证基因分型
        3.1.4 统计学分析
        3.1.5 连锁不平衡和单体型分析
    3.2 近视易感基因SNTB1的相关功能研究实验结果
        3.2.1 CCK8法分析SNTB1基因对细胞增殖的影响
        3.2.2 SNTB1基因对3T3细胞和293T细胞迁移粘附的影响
第四章 讨论
    4.1 COL11A1和COL18A1基因与近视相关性分析实验结果分析
        4.1.1 COL11A1和COL18A1基因实验结果分析
        4.1.2 易感基因分析
    4.2 近视易感基因SNTB1的相关功能研究实验结果分析
        4.2.1 SNTB1基因实验结果分析
        4.2.2 SNTB1基因编码的蛋白相关功能分析
第五章 全文总结与展望
    5.1 本研究结果总结
        5.1.1 COL11A1和COL18A1基因与近视相关性分析实验结果总结
        5.1.2 近视易感基因SNTB1的相关功能研究实验结果总结
    5.2 下一步工作展望
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间取得的成果



本文编号：4042143