MCU介导的线粒体Ca 2+ 稳态失调参与模拟失重引起的大鼠脑动脉平滑肌细胞凋亡

发布时间：2025-05-28 02:17

　　 目的观察线粒体钙单向转运体(mitochondrial Ca²⁺ uniporter,MCU)在模拟失重引起大鼠脑动脉平滑肌细胞凋亡中的作用。方法采用尾吊大鼠方法建立模拟失重模型,实验大鼠分为对照（Control,CON）组和尾吊（tail suspension,SUS）组。造模成功后,分离脑动脉血管,取病理切片行TUNEL染色及细胞色素C免疫荧光染色检测平滑肌细胞凋亡水平,蛋白免疫印迹实验检测凋亡相关蛋白及MCU蛋白表达水平,最后急性分离脑动脉平滑肌细胞,分别采用Rhod-2 AM、mitoSOX染色检测细胞线粒体内Ca²⁺水平和活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）水平。结果与对照组比较,尾吊组模拟失重大鼠基底动脉平滑肌细胞TUNEL阳性率显著增加（P<0.05）,细胞色素C入核率显著增加（P<0.05）,促凋亡蛋白cleaved caspas-9、cleaved caspas-3、Bax表达显著增加（P<0.05）,抑制凋亡蛋白Bcl-2显著降低（P<0.05）;同时,MCU蛋白表达水...

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 模拟失重大鼠模型的建立
        1.2.2 TUNEL染色法检测细胞凋亡
        1.2.3 Western blot法检测蛋白表达
        1.2.4 急性分离大鼠脑动脉平滑肌细胞
        1.2.5 免疫荧光检测脑动脉平滑肌细胞MCU与细胞色素C
        1.2.6 脑动脉平滑肌细胞线粒体ROS与Ca2+浓度检测
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 实验动物建模
    2.2 模拟失重对大鼠脑动脉血管平滑肌细胞凋亡的影响
    2.3 模拟失重大鼠脑动脉血管平滑肌细胞MCU表达的检测
    2.4 模拟失重大鼠脑动脉平滑肌细胞线粒体Ca2+浓度的检测
    2.5 模拟失重大鼠脑动脉平滑肌细胞ROS水平的检测
3 讨论



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