24-脱氢胆固醇还原酶（DHCR24）与HRAS蛋白相互作用在癌症发病机制中作用的初步研究

发布时间：2025-06-26 23:34

　　癌症是细胞的生长、增殖和凋亡的紊乱引起的一种疾病。近期研究发现,癌症的发生与细胞内胆固醇的水平相关,并且利用降胆固醇以及抑制脂滴形成的药物能够治疗多种癌症。24-脱氢胆固醇还原酶(3β-hydroxysterol D24-reductase,DHCR24)是胆固醇生物合成过程中的最后一步的酶,催化链甾醇还原成胆固醇。然而DHCR24在癌症中的分子机制研究还不多见。因此本研究在前期研究的基础上,通过分析DHCR24相互作用组,利用Duolink等蛋白质组学的手段,以确定DHCR24在癌症中可能发生的相互作用的蛋白,并通过细胞实验来推测DHCR24及其相互作用蛋白在癌症发生发展中的重要作用。首先,利用实验室早期得到的免疫共沉淀质谱数据以及四个公开的蛋白质相互作用数据库构建了DHCR24相互作用蛋白组,并通过对其进行细胞通路分析发现,DHCR24相互作用组主要富集于癌症发生发展相关通路,并且通过PPI网络分析发现,DHCR24对癌症发生发展的影响可能是通过HRAS来实现的。GEPIA在线分析显示DHCR24在多种癌症的患者中显著上调表达,而且DHCR24的表达与HRAS的表达在癌症中具有相关性...

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
    0.1 胆固醇与癌症
        0.1.1 胆固醇代谢和稳态调节
        0.1.2 癌症中胆固醇的重编程
        0.1.3 胆固醇调控在癌症治疗中的作用
    0.2 24-脱氢胆固醇还原酶结构和功能
        0.2.1 DHCR24的结构
        0.2.2 DHCR24功能
        0.2.3 DHCR24相互作用蛋白研究
    0.3 RAS与癌症
        0.3.1 RAS结构和功能
        0.3.2 RAS调控在癌症发生发展中的作用
    0.4 蛋白质组学
    0.5 研究目的及意义
第一章 DHCR24相互作用蛋白数据库的构建及相互作用网络分析
    1.1 实验方法
        1.1.1 构建DHCR24 蛋白质相互作用数据库并进行KEGG分析。
        1.1.2 构建DHCR24 蛋白质相互作用数据库的PPI网络并寻找可能的相互作用蛋白
        1.1.3 GEPIA在线分析DHCR24 基因在癌症中的表型
    1.2 结果与讨论
        1.2.1 蛋白质相互作用数据库KEGG分析显示DHCR24 可能参与了癌症的发生发展
        1.2.2 PPI网络分析显示DHCR24 可能能够与HRAS发生相互作用
        1.2.3 DHCR24在多种癌症中高表达且与患者的生存相关。
    1.3 结论
第二章 DHCR24与HRAS相互作用研究
    2.1 实验方法
        2.1.1 计算机模拟DHCR24与HRAS相互作用
        2.1.2 细胞水平验证DHCR24与HRAS相互作用
    2.2 实验结果与讨论
        2.2.1 多模板同源建模获得DHCR24蛋白质三维结构
        2.2.2 ZDOCK对接结果显示DHCR24 能够与活化后的HRAS发生相互作用
        2.2.3 Duolink技术结果证明在EGF刺激后的5637 细胞中DHCR24 能够与HRAS发生相互作用
    2.3 结论
第三章 DHCR24与HRAS相互作用在癌症发病中的作用
    3.1 .实验材料
        3.1.1 生化试剂和耗材
        3.1.2 主要仪器设备
    3.2 实验方法
        3.2.1 DHCR24与HRAS相互作用对癌症细胞生长的影响
        3.2.2 Filipin染色验证DHCR24与HRAS相互作用对5637 细胞细胞膜上胆固醇含量的影响
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 DHCR24 抑制剂U18666A能够抑制5637 癌细胞增殖
        3.3.2 EGF能够促进5637细胞合成胆固醇
        3.3.3 U18666A与 lonafarnib均能够抑制5637 癌细胞中EGF引发的胆固醇合成
    3.4 结论
第四章 讨论与展望
致谢
参考文献
攻读学位期间学术论文及参加科研情况



本文编号：4053446