胃癌的中医证型分布情况及脾胃虚寒型胃癌的iTRAQ研究和个体化治疗分子检测
发布时间:2018-01-12 23:34
本文关键词:胃癌的中医证型分布情况及脾胃虚寒型胃癌的iTRAQ研究和个体化治疗分子检测 出处:《锦州医科大学》2017年硕士论文 论文类型:学位论文
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【摘要】:目的通过对胃癌进行中医辨证分型,统计每个中医证型的胃癌在整体中所占的比例,并收集其中最常见中医证型(脾胃虚寒型)的胃癌患者的组织标本,进行iTRAQ和个体化分子治疗检测相关的研究。方法1.通过中医证型调查表,收集胃癌患者的基本病例资料,统计我院的胃癌的中医证型分布情况。2.收集最常见的中医证型(脾胃虚寒型)的胃癌患者的组织标本,分胃癌组和癌旁正常对照组(简称:对照组),进行iTRAQ的研究,并利用western blot的方法对其中的五个蛋白(FLNA、VASP、CAV1、COL4A2、PRKCA)进行验证。3.对脾胃虚寒型胃癌患者的甲醛浸泡处理固定后的组织标本进行了6个基因的个体化分子治疗检测,并讨论其中的切除修复交叉互补基因1和TOPOⅡA m RNA的表达情况,及对应的靶向化疗药物。结果1.胃癌的中医证型分布频率由多到少的分布情况如下:脾胃虚寒型(42.9%),气血两虚型(24.1%),瘀血内结型(13.4%),胃热阴虚型(8.9%),肝胃不和型(7.1%),痰湿阻滞型(3.6%)。2.胃癌组和对照组的iTRAQ实验结果提示:同对照组相比,胃癌组一共鉴定到了2770个蛋白质,其中上调倍数大于1.2倍的蛋白质有147个(P0.05),下调倍数小于0.8倍的有159个(P0.05)。其中,有明显差异的蛋白质(P0.05)共参与了41个KEGG信号通路,在差异蛋白数量最多的Focal adhesion通路中,有统计学意义的差异蛋白有14个,具体的蛋白质为:COL6A3、MYLK、VASP、FLNC、FLNA、ACTN2、PARVA、ACTN1、ITGA5、CAV1、VCL、PRKCA、COL4A2、ITGA1。利用western blot的方法对其中的五个目的蛋白质(FLNA、VASP、CAV1、COL4A2、PRKCA)进行验证,验证结果提示其表达趋势和iTRAQ结果中这五个蛋白质的表达趋势大致相同,均呈下降趋势。具体的iTRAQ结果如下:(1)FLNA蛋白又称为细丝蛋白A,胃癌组的FLNA表达量比对照组下降了0.502倍。(2)血管扩张刺激磷蛋白(VASP),胃癌组的VASP表达量比对照组下降了0.472倍。(3)CAV1(Caveolin 1)也称小凹蛋白,胃癌组的CAV1的表达量比对照组下降了0.604倍。(4)COL4A2是Collagen IV(4型胶原蛋白,COL IV)的一种,胃癌组的COL4A2的表达量比对照组下降了0.604倍。(5)PRKCA也称蛋白激酶Ca,是蛋白激酶C(PKC)的一种,胃癌组的PRKCA的表达量比对照组下降了0.645倍。3.对胃癌患者的手术标本进行了6个基因的个体化分子治疗检测,并对其中两个基因进行探讨。(1)当患者的切除修复交叉互补基因1(ERCC1)低表达时,可以通过核苷酸切除修复途径,识别DNA链上的损伤部位,接着进行剪切、转录、编码等,此时,铂类药物对肿瘤细胞的敏感性较高,应用含有铂类药物的化疗方案,可提高患者化疗的临床疗效。(2)根据检测报告的推荐意见和相关的文献研究发现,依托泊苷通过抑制TOPOⅡA的活性发挥抗肿瘤作用,当TOPOⅡA m RNA的表达水平高时,其对依托泊苷的敏感性较高,可在临床治疗时选择含有依托泊苷的化疗方案进行化疗。结论1.在胃癌的中医证型的分型中,脾胃虚寒型最多见,治疗可以选用附子理中汤、补中益气汤等加减。2.在胃癌组和对照组的iTRAQ实验中,一共鉴定到了2770个蛋白质,这些蛋白共参与了41个信号传导通路,其中,Focal adhesion通路的五个蛋白FLNA、VASP、CAV1、COL4A2、PRKCA的表达量,胃癌组均比对照组明显下降。这五个蛋白经western blot验证其表达趋势和iTRAQ数据中大致相同,也都呈下降趋势。推测可能是细胞外的COL4A2表达下调后,通过信号传导,使细胞膜上的CAV1表达下调,进而影响细胞内FLNA、VASP、PRKCA的表达也下调。3.对部分胃癌患者的手术标本进行了6个基因的个体化分子治疗检测,观察到:当胃癌患者的切除修复交叉互补基因1(ERCC1)低表达时,表明其对铂类药物的敏感性较高,可选择含有铂类药物的化疗方案;当TOPOⅡA m RNA的表达水平高时,表明其对依托泊苷的敏感性较高,可选择含依托泊苷的化疗方案。
[Abstract]:Objective to gastric cancer TCM type, the statistics of each TCM syndrome type of gastric cancer in total in proportion, and collect the most common TCM syndromes (spleen and stomach) in patients with gastric cancer tissue samples, iTRAQ and individualized treatment research related to molecular detection. Methods 1. by TCM the questionnaire, collect the basic data of patients with gastric cancer cases,.2. TCM syndrome type distribution of gastric cancer in our hospital collected the most common TCM syndrome type (spleen deficiency type) in patients with gastric cancer tissues, adjacent normal gastric cancer group and control group (referred to as: control group, iTRAQ) were studied, and the among the five proteins by using the method of Western blot (FLNA, VASP, CAV1, COL4A2, PRKCA) to verify the.3. tissue after fixation of formaldehyde soaking treatment on patients with spleen deficiency type of gastric cancer are individual molecules found 6 gene therapy Test, and discuss the expression of excision repair cross complementing gene 1 and TOPO II A m RNA, and the corresponding targeted chemotherapy. Results the distribution of TCM Syndromes of type 1. gastric cancer frequency distribution from more to less as follows: spleen deficiency type (42.9%), two (24.1%) of Qi and blood deficiency, blood stasis within the junction (13.4%), stomach yin deficiency type (8.9%), incoordination between the liver and stomach (7.1%), phlegm stagnation (3.6%) the results of iTRAQ.2. in gastric cancer group and control group: compared with the control group, the gastric cancer group we identified 2770 proteins, including protein up-regulated more than 1.2 times the 147 (P0.05), down less than 0.8 times of multiples of 159 (P0.05). Among them, there are significant differences in the total protein (P0.05) in the 41 KEGG signal pathway, in the largest number of Focal proteins in the adhesion pathway, the difference was statistically significant protein 14, protein specific: COL6A3, MYLK, V ASP,FLNC,FLNA,ACTN2,PARVA,ACTN1,ITGA5,CAV1,VCL,PRKCA,COL4A2,ITGA1.鍒╃敤western blot鐨勬柟娉曞鍏朵腑鐨勪簲涓洰鐨勮泲鐧借川(FLNA,VASP,CAV1,COL4A2,PRKCA)杩涜楠岃瘉,楠岃瘉缁撴灉鎻愮ず鍏惰〃杈捐秼鍔垮拰iTRAQ缁撴灉涓繖浜斾釜铔嬬櫧璐ㄧ殑琛ㄨ揪瓒嬪娍澶ц嚧鐩稿悓,鍧囧憟涓嬮檷瓒嬪娍.鍏蜂綋鐨刬TRAQ缁撴灉濡備笅:(1)FLNA铔嬬櫧鍙堢О涓虹粏涓濊泲鐧紸,鑳冪檶缁勭殑FLNA琛ㄨ揪閲忔瘮瀵圭収缁勪笅闄嶄簡0.502鍊,
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