基于Fenton反应产生的羟自由基检测方法比较

发布时间：2025-07-05 10:55

　　 通过在Fenton反应体系中加入具有清除·OH活性的维生素C,观察羟基自由基效应是否会减弱或消除,进一步探讨荧光分光光度法、紫外分光光度法、电子自旋共振法(ESR)测定羟自由基的测定方法。并对上述3种方法测定·OH的可行性和可靠性进行分析。实验结果表明:荧光分光光度法和紫外可见光分光光度法测定羟自由基虽然测定原理涉及多步反应,但方法简便、易操作,不涉及大型贵重仪器,适用于定量检测中低浓度的羟自由基的研究。自旋捕捉-电子自旋共振技术能够直接捕捉住目标羟基自由基,简单易行。相比于荧光分光光度法,紫外可见光分光光度法方法具有灵敏度高、反应快速、无需对样品特殊处理等优点。

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【部分图文】：

图1 荧光分光光度法测定不同浓度维生素C清除·OH曲线

苯甲酸-Fenton体系荧光分光光度法法利用Fenton体系产生·OH，与荧光很弱的苯甲酸反应，生成具有强荧光的二羟基苯甲酸。该方法测量简单、方便、准确，但是影响荧光强度的因素较多，包括环境温度、酸度、溶剂、光照等。另外羟自由基寿命很短，在溶液中大约只能存在微秒级，且浓度很低，因....

图2 紫外可见光分光光度计扫描的吸收曲线

紫外分光光度法实验结果表明：维生素C表现出明显的清除·OH的活性（见表3）。随着维生素C浓度的增加，清除能力也逐渐增加。计算水杨酸-紫外分光光度法测定维生素C清除羟自由基半数清除率IC50为0.8108mmol/L。由实验结果可以看出，水杨酸-紫外可见光分光光度法测定羟自由基....

图3 不同浓度维生素C清除羟自由基的ESR图谱

电子顺磁共振波谱法实验结果（见表4）表明：与空白对照相比，维生素C表现出明显的清除·OH的活性，不同浓度维生素C清除·OH信号见图3。可以明显地看出随着维生素C浓度的增加，羟自由基加合物的信号也明显减弱，表明其清除能力也逐渐增加。依据清除率计算电子顺磁共振波谱法测定维生素C清除羟....

本文编号：4055991