不结球白菜BrABF3基因的克隆与功能分析

发布时间：2025-05-11 03:44

　　 [目的]本文旨在研究BrABF3基因在不结球白菜开花时间调控中的功能。[方法]以不结球白菜‘苏州青’为材料,通过同源克隆获得BrABF3基因全长序列,再与其他物种中的同源序列进行进化树分析;利用注射法将农杆菌导入烟草叶片研究BrABF3基因的亚细胞定位;利用PlantCARE在线软件分析启动子motif元件;采用荧光定量PCR(RT-qPCR)技术分析BrABF3基因在早花品种‘苏州青’和晚花‘五月慢’品种不同生长期的表达情况。[结果]BrABF3基因含有1 242 bp开放阅读框,编码413个氨基酸,其蛋白定位于细胞核。在进化过程中BrABF3的氨基酸序列与甘蓝型油菜亲缘关系最近。BrABF3启动子序列中含有大量的motif元件,如光响应元件、激素响应元件和胁迫响应元件等。RT-qPCR结果表明,开花前BrABF3基因在晚花品种‘五月慢’中的表达显著高于早花品种‘苏州青’。[结论]本试验克隆并获得BrABF3基因,其蛋白定位于细胞核,而且在晚花品种中高表达,推测该基因可能参与调控不结球白菜的开花时间。

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 不结球白菜BrABF3基因的克隆
    1.2 不结球白菜BrABF3基因的氨基酸和系统进化树分析
    1.3 gateway技术构建载体
        1.3.1 BrABF3基因片段的PCR扩增
        1.3.2 BP重组反应
        1.3.3 LR重组反应
    1.4 BrABF3亚细胞定位分析
    1.5 BrABF3启动子序列分析
    1.6 开花时间统计分析
    1.7 BrABF3基因的RT-qPCR分析
2 结果与分析
    2.1 不结球白菜BrABF3基因的克隆
    2.2 不结球白菜BrABF3基因的氨基酸和系统进化树分析
    2.3 不结球白菜BrABF3的亚细胞定位分析
    2.4 BrABF3启动子序列分析
    2.5 不结球白菜开花时间统计分析
    2.6 不结球白菜BrABF3基因的RT-qPCR分析
3 讨论



本文编号：4044793