敲除OIP5-AS1基因通过miR-7-5p/PARP1轴增强非小细胞肺癌细胞的化学敏感性

发布时间：2025-05-11 03:51

　　 目的探讨OIP5-AS1基因对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)细胞化学敏感性的作用及分子机制。方法采用CCK-8法检测正常肺细胞系BEAS-2B、肺癌细胞系A549和顺铂耐药肺癌细胞A549/DDP的半抑制浓度(IC50)值。应用RT-qPCR检测OIP5-AS1、miR-7-5p和PARP1的表达水平。生物信息学检测OIP5-AS1、miR-7-5p和PARP1的靶向关系,用荧光素实验进一步验证。Western blot法检测相关蛋白的表达;流式细胞术检测细胞凋亡情况;克隆形成检测细胞生长情况。结果 A549/DDP细胞中IC50值最高,且OIP5-AS1高表达,miR-7-5p低表达。miR-7-5p是OIP5-AS1的靶向调节基因之一,且为负调控关系。敲除OIP5-AS1抑制A549/DDP细胞的生长并增强化学敏感性,促进A549/DDP细胞凋亡。敲除OIP5-AS1下调PARP1可以增强A549/DDP细胞的化学敏感性,抑制NSCLC的生长和凋亡。结论 OIP5-AS1通过上调miR-7-5p或下调PARP1,增强A549/DD...

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养和转染
        1.2.2 CCK-8
        1.2.3 RT-qPCR检测OIP5-AS1、miR-7-5p和PARP1的表达水平
        1.2.4 双荧光素酶报告分析
        1.2.5 克隆形成检测
        1.2.6 Western blot法
        1.2.7 流式细胞术检测细胞凋亡情况
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 A549/DDP细胞中OIP5-AS1、miR-7-5p、PARP1的表达
    2.2 OIP5-AS1和miR-7-5p的靶向关系
    2.3 敲除OIP5-AS1对A549/DDP细胞IC50值的影响
    2.4 敲除OIP5-AS1对A549/DDP细胞生长的影响
    2.5 敲除OIP5-AS1后Ki-67、PCNA、MDR1蛋白表达
    2.6 敲除OIP5-AS1对A549/DDP细胞凋亡的影响
    2.7 敲除OIP5-AS1后Bax、BCL-2蛋白表达
    2.8 敲除OIP5-AS1调节miR-7-5p/PARP1轴增强A549/DDP细胞的化学敏感性
3 讨论



本文编号：4044801