苹果bZIP转录因子MdbZIP48的克隆与基因功能分析

发布时间：2025-06-10 05:28

　　苹果（Malus domestica Borkh）是人们经常食用的水果之一,在世界范围内广泛种植。但是,苹果受到干旱及高盐等逆境的胁迫限制了苹果的产量及品质。研究表明,碱性亮氨酸拉链（bZIP）蛋白具有很多重要的生物学功能,如:信号转导,响应压力反应,促进生长和发育,并且可以提高植物抗非生物胁迫的能力。课题组分析了bZIP转录因子家族,从苹果基因组中鉴定得到112个bZIP基因,并结合基因表达和进化分析,揭示了它们在苹果的生长发育及抵御胁迫方面的功能。在此基础上,本研究从苹果中克隆bZIP家族基因中的MdbZIP48,转化模式植物拟南芥,开展bZIP基因的功能和作用机制研究,为苹果的抗性品种选育和遗传改良从分子水平上提供了依据。获得如下研究结果:1.以富士苹果cDNA为模板,从中克隆得到MdbZIP48基因的CDS序列,GenBank登录号为XM₀08367053.2,序列分析发现该基因开放阅读框长度为900bp,编码299个氨基酸,具有典型的bZIP结构域,属于苹果bZIP转录因子的A亚家族。构建过表达载体,在农杆菌介导下,转化模式植物拟南芥。2.研究发现,在干旱...

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图2-1MdbZIP48基因的克隆1：MdbZIP48的cDNA；M：DNAMarkerDL2000Fig.2-1GenecloningofMdbZIP48

图2-1MdbZIP48基因的克隆1：MdbZIP48的cDNA；M：DNAMarkerDL2000Fig.2-1GenecloningofMdbZIP481:cDNAofMdbZIP48gene;M:DNAMarkerDL2000

图2-2MdbZIP48-2300载体菌液PCR鉴定M：DNAmarkerDL1000；1，2，3：携带MdbZIP48基因的阳性克隆

图2-2MdbZIP48-2300载体菌液PCR鉴定M：DNAmarkerDL1000；1，2，3：携带MdbZIP48基因的阳性克隆Fig.2-2PCRamplifyofrecombinantplasmidofMdbZIP48-2300vecto....

图2-4MdbZIP48与其他相近物种bZIP氨基酸保守结构域序列比对

图2-4MdbZIP48与其他相近物种bZIP氨基酸保守结构域序列比对。相关基因的Genbank登录号为：AtABF1（NP₅64551.1）,AtABF3（NP₈49490.2）,AtABF4（NP<sub>5</s....

图2-5重组载体转入GV3101后的菌液PCR检测M：DNAmarkerDL1000；1，2，3：携带MdbZIP48基因的阳性克隆

2.3.2MdbZIP48基因过量表达载的及转基因拟南芥的重组质粒构建成功后，转化GV3101，进行菌液PCR鉴定（图2-5）。图2-5重组载体转入GV3101后的菌液PCR检测M：DNAmarkerDL1000；1，2，3：携带MdbZIP48基因的阳性克....

本文编号：4050377