HRM技术在检测冠心病患者脂代谢相关基因中的应用

发布时间：2025-06-26 02:48

　　目的:分析ApoE基因多态性与冠心病患者冠脉病变程度及血脂水平的关系。方法:选取2017年6月至2018年9月于沈阳军区总医院住院并首次行冠脉造影确诊为冠心病的患者179例(心绞痛90例,心梗89例);经冠脉造影或冠脉CT造影为阴性的30例患者作为对照组。采纳患者均排除严重肝肾功能障碍,甲状腺疾病,恶性肿瘤,家族性高脂血症等,采用PCR-HRM方法测定患者ApoE基因型,血脂水平按常规方法检测,同时记录患者年龄,高血压病史,吸烟史,饮酒史,脑血管病史等临床资料及总胆固醇,甘油三酯,高密度脂蛋白,低密度脂蛋白,同型半胱氨酸等检验指标,记录患者冠脉狭窄支数,并用Gensini评分法评估冠脉病变的严重程度。对比心绞痛组(90例)和急性心梗组(89例)间ApoE基因型及ε2,ε3,ε4三个等位基因频率,比较基因多态性与心梗之间的关系;对比三个等位基因与冠脉病变支数和Gensini分值,进一步分析ApoE基因型与冠脉病变支数及冠脉病变程度的相关性。结果:1、179例冠心病患者共发现6种基因型(ε3/ε3,ε3/ε4,ε2/ε3,ε2/s4,ε2/ε2,ε4/ε4)和三种等位基因(ε2,ε3,ε4)...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２：不同ＤＮＡ浓度下的ＰＣＲ扩增曲线：棕３００ｎｇ／｜？ｉＬ，黄ｌＯＯｎｇ／＾Ｌ，紫３０ｎｇ／（ｎＬ，红??１０ｎｇ／（ｉＬ，灰?１００ｐｇ／｜ｉＬ，绿?ｌｐｇ／｜ａＬ??

与ｒｓ７４１２两个位点ＰＣＲ产物电泳图；最左侧为ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ，??前丨１泳道扩增产物片段大小为８９?ｂｐ；后１１泳道扩增产物大小片段为７０?ｂｐ。??３．２?ＨＲＭ反应体系的建立??１）不同ＤＮＡ模板浓度??调制?３００?ｎｇ／（ｉＬ，１００?ｎｇ／｜ｉＬ，３０?ｎｇ／｜....

图４：不同引物浓度下的ＰＣＲ扩增曲线：从左向右：红１．２?ｎＬ，青１．６?｜ｉＬ，紫：２．０?ｎＬ，??灰?２．４（ｉＬ，黄色?２．８ｐＬ??

３?２５?２７?２９?３１?３３?３５?３７?｝９?＜１?ｉ３??Ｃｆｃｉｅｓ??图３：不同引物浓度下的ＰＣＲ扩增曲线：从左向右：绿０．２?ｎＬ，红０．４?ｐＬ，蓝：０．６?ｎＬ，??黄色?０．８?ｐＬ，红?１．０?ｎＬ??３）不同Ｍｇｃｌ２浓度??加入?ｌ．２｜ａＬ，１．６ｐＬ....

图３：不同引物浓度下的ＰＣＲ扩增曲线：从左向右：绿０．２?ｎＬ，红０．４?ｐＬ，蓝：０．６?ｎＬ，??黄色?０．８?ｐＬ，红?１．０?ｎＬ??

大连医科大学硕士学位论文??足，检测不同引物浓度下的ＰＣＲ扩增曲线，如图３所示。综合来看，引物体积在??０．２ｐＬ时，ＰＣＲ扩增曲线最好。??Ｆｈｉｏｒｔｆｃｏｃｅ?Ｈｉｓｔｏｒｙ??Ｔ１削??５?幽！?〇?６ｎｉ?????ｓ，ａｍ??；，３〇｝?〇＿ａｗｉ???＾－４ｙｆ??；....

图５：?ｒｓ７４１２各个基因型Ｔｍ值??

大连医科大学硕士学位论文??８７．９０°Ｃ。野生型和杂合型Ｔｍ值差异较大，可通过Ｔｍ区分杂合型和纯合型，但??是野生纯合型和突变纯合型间虽然Ｔｍ值差异较小，但是其可通过熔解曲线区分??开来，如图５－图７所示。??２?Ｍｅｌｔｉｔｉ；??＿???．?．?．?．??Ｓ騰?土??ｓ歷?....

本文编号：4053031