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番茄SlCBL1基因的克隆与生物学功能初探

发布时间:2025-08-12 21:04
   类钙调磷酸酶B亚基蛋白(calcineurin B-like proteins,CBLs)是植物中一类特殊的钙离子感受器,在应对多种生物与非生物胁迫反应中起到十分重要的作用.目前有关CBLs基因生物学功能研究主要集中于拟南芥与水稻,番茄中相关功能报道较少.研究利用同源克隆方法,从番茄中分离出1个SlCBL1基因;应用半定量PCR技术研究SlCBL1基因在不同组织的相对表达水平,将该基因构建超表达载体并遗传转化本氏烟.结果表明:SlCBL1基因cDNA全长639 bp,编码212个氨基酸残基;基因组全长5 000 bp,包含8个外显子及7个内含子;推导的氨基酸序列与烟草NtCBL1蛋白相似度最高,且包含CBL蛋白结合Ca2+所必需的4个EF手型结构.SlCBL1在番茄不同组织中均有表达,但在营养器官中的表达最高,并且响应多种非生物胁迫.与对照相比,过超量表达SlCBL1基因的本氏烟株系提高了对盐胁迫的抗性.上述研究表明,番茄SlCBL1基因能够响应并拮抗非生物胁迫,这为进一步研究CBL1生物学功能提供了基础.

【文章页数】:7 页

【部分图文】:

图1 番茄SlCBL1推导氨基酸序列特征及系统进化树

图1 番茄SlCBL1推导氨基酸序列特征及系统进化树

采用半定量RT-PCR分析SlCBL1基因在番茄不同组织中的表达情况,发现该基因在各种器官中均有表达,在根、茎、叶等营养器官中表达丰度较高(见图3).分别对四叶一心期的番茄苗分别进行ABA、pH、盐、干旱、低温等胁迫处理,发现SlCBL1基因均能被上述逆境在不同程度上诱导表达(见....


图2 SlCBL1基因的结构特征

图2 SlCBL1基因的结构特征

图1番茄SlCBL1推导氨基酸序列特征及系统进化树图3SlCBL1基因在胁迫处理及不同组织中的表达情况


图3 SlCBL1基因在胁迫处理及不同组织中的表达情况

图3 SlCBL1基因在胁迫处理及不同组织中的表达情况

图2SlCBL1基因的结构特征图4SlCBL1的过表达载体的PCR及酶切验证


图4 SlCBL1的过表达载体的PCR及酶切验证

图4 SlCBL1的过表达载体的PCR及酶切验证

图3SlCBL1基因在胁迫处理及不同组织中的表达情况2.4超表达SlCBL1转基因本氏烟植株的获得



本文编号:4059131

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