少孢节丛孢中生物合成相关基因的功能及嗜热踝节菌突变菌株构建的研究

发布时间：2021-06-18 20:04

　　少孢节丛孢（Arthrobotrys oligospora）作为模式捕食线虫真菌可以通过产生三维菌网捕捉并杀死线虫,本论文初步研究了细胞色素P450基因AOL_s00215g21及4个次生代谢产物调控因子AOLs00043g51,AOL s00054g811,AOL_s00076g605,AOL_s00215g535的生物功能。通过运用生物信息学分析,在少孢节丛孢全基因组中筛选出5个候选基因,分别是细胞色素P450基因AOL_s00215g21,表观遗传调控因子AOL_s00043g51及AOL_s00076g605,全局调控因子AOL_s00054g811,信号转导通路调控因子AOL_s00215g535。运用In-Fusion的方法构建敲除载体,CaCl2/PEG介导的原生质体转化方式敲除这5个基因。通过潮霉素筛选验证得到阳性转化子,通过对其表型、生测和代谢图谱实验探究这5个基因的功能。发现与野生菌株相比,突变菌株△AOL<... 

【文章来源】：云南大学云南省 211工程院校

【文章页数】：171 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１－１真菌次生代谢产物在生态中的角色（Ｍａｃｈｅ丨ｅｉｄＵＷ．，２０１６）??

ｇ．－ｘａｍｐｅｓ?ｏｓｅｃｏｎａｒｙ?ｍｅａｏｅｓ?ｐｒｏｕｃｅｙｕｎｇ实际上真菌产生次生代谢产物的能力被大大低估了。因为在不同的真菌物种??中有大量的次生代谢产物生物合成基因簇存在，但在标准培养条件下大多数是??沉默的，所以到目前为止只有相当少的一部分次生代谢产物被发现（Ｍａｃｈｅｌｅｉｄｔ??２０１６）。在过去的十年中很多学者都在研究次生代谢产物的调控机制，并致??力于鉴定出更多的新次生代谢产物，而这个领域中所取得的成绩主要来自于激??活沉默次生代谢产物生物合成基因簇（Ｂｒａｋｈａｇｅ，２０１３；?Ｓａｎｃｈｅｚ?￡＞／?乂．，２０１２）。图??

?２．２．２?４３ｇ５１蛋白的氨基酸序列分析??如图２－３得知４３ｇ５１?的功能为ＳＰＲＹ?（ＳＰｌＡｋｉｎａｓｅ?ｏｆｒａｂｂｉｔ?Ｒｙａｎｏｄｉｎｅ?ｒｅｃｅｐｔｏｒ）??超家族。如图２－４得知４３ｇ５１与其氨基酸序列同源性最高的为??的Ｓｅｔｌ复合元件，但除此之外与其同源性相近的大多是ＣｃｌＡ（Ｈｉｓｔｏｎｅ??３?ｌｙｓｉｎｅ?４?（Ｈ３Ｋ４）?ｍｅｔｈｙｌａｔｉｎｇ?ＣＯＭＰＡＳＳ?ｃｏｍｐｌｅｘ）；蛋白，因此推测?４３ｇ５１?的功??能应该也是如此。??１?ｍ?２Ｍ?…?５（１?Ｍｉ?Ｗ７??Ｉ?Ｉ?Ｉ?｜?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ??Ｑｕｅｎ）?ｓｅｑ＊?■■■■■■■■■■■

【参考文献】：
期刊论文
[1]捕食线虫真菌的潮霉素抗性基因标记及其在土壤抑菌研究中的应用[J]. 徐进,莫明和,张克勤.  西南农业学报. 2005(03)



本文编号：3237299