去乙酰转移酶ZmHDA101与TPL/TPRs蛋白的互作研究

发布时间：2025-05-27 23:19

　　 ZmHDA101是玉米去乙酰转移酶家族的重要成员之一,其作用的分子机制尚未明确。为了明确ZmHDA101与TPL/TPRs蛋白之间的互作关系,本研究利用Gateway技术,构建了ZmHDA101、TPL/TPRs的酵母双杂交载体AD/BD-ZmHDA101、AD/BD-AtTPL、AD/BD-AtTPR1、AD/BD-AtTPR2、AD/BD-AtTPR3和AD/BD-AtTPR4;利用酵母双杂交技术,分析了ZmHDA101与TPL/TPRs蛋白之间的互作关系。结果发现,共同转化了ZmHDA101与TPL/TPRs组合的酵母均能在-Leu/-Trp、-Leu/-Trp/-His和-Leu/-Trp/-His+3-AT培养基上正常生长,而转化了对照组合的酵母不能在-Leu/-Trp/-His或-Leu/-Trp/-His+3-AT培养基上正常生长,表明ZmHDA101与AtTPL、AtTPR1、AtTPR2、AtTPR3和AtTPR4在酵母细胞中均能够直接互作。研究结果为阐明ZmHDA101在玉米生长发育和抵抗生物/非生物胁迫中的功能及其调控机制奠定了基础。

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【部分图文】：

图3 ZmHDA101、TPL/TPRs的自激活活性检测

对ZmHDA101、TPL/TPRs的自激活活性进行检测，结果发现，转化了BD-ZmHDA101、BD-AtTPL、BD-AtTPR1、BD-AtTPR2、BD-AtTPR3、BD-AtTPR4和空载体BD的酵母均能够在-Trp培养基上生长良好，表明酵母转化成功；转化了BD-At....

图4 Zm HDA101与TPL/TPRs的酵母双杂交结果

利用酵母双杂交技术，检测ZmHDA101与TPL/TPRs蛋白之间的互作关系，结果发现，共同转化了ZmHDA101与TPL/TPRs组合（AD-ZmHDA101+BD-AtTPL、BD-ZmHDA101+AD-AtTPL、AD-ZmHDA101+BD-A....

图4 Zm HDA101与TPL/TPRs的酵母双杂交结果

图4ZmHDA101与TPL/TPRs的酵母双杂交结果3结论与讨论

图1 ZmHDA101基因的酵母双杂交载体构建

使用ZmHDA101基因的特异性引物扩增获得ZmHDA101(1554bp）的基因片段（图1A），回收目的片段后将其与入门载体pBM27连接，转化大肠杆菌感受态细胞，菌落PCR鉴定获得与目的片段大小一致的单一条带（图1B），进一步测序鉴定后获得ZmHDA101基因的入门载体p....

本文编号：4047708