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棉纤维木脂素的分离鉴定及其合成相关基因GhPCBER的功能初步分析

发布时间:2025-08-12 16:51
  棉花是世界上重要的天然纤维生产作物,棉纤维的质量与产量是推动棉纺织产业经济发展的主要动力。我国棉产品消费位于世界前列,但棉纤维品质较差,在纤维细度、强度和长度上仍具有较大的提升空间。棉纤维主要是由纤维素、半纤维素组成,近年来研究发现棉纤维发育过程中存在大量的苯丙烷化合物,苯丙烷代谢途径被认为是仅次于纤维素合成的第二大代谢途径,该途径可能对棉纤维的发育及品质形成具有重要的影响。苯丙烷代谢途径产生的次级代谢产物包含木质素、木脂素、黄酮等各类物质,其中木脂素类化合物是由苯丙素小分子聚合而成的一类植物雌激素,许多植物的木质部、根、茎、叶中均发现含有木脂素类化合物,其不仅具有一定的细胞毒性和植物毒性,还可以促进植物防御病虫害。PCBER是合成苯丙烷物质——木脂体的关键酶基因,主要存在于木本植物细胞中,在棉花各组织器官中均有表达,目前木脂体在棉花中存在的具体形式还不清楚。本研究对棉纤维中的木脂素类化合物进行分离鉴定,以分析木脂体以何种形式存在于棉纤维中;同时将GhPCBER基因转化拟南芥和棉花,探究GhPCBER基因表达水平的改变对棉花苯丙烷物质含量的影响,挖掘苯丙烷类物质在棉纤维发育过程中的作用。...

【文章页数】:70 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图3-6转基因拟南芥中的木质素、木脂素、总黄酮含量测定Fig.3-6Determinationoflignin,lignanandtotalflavonoidsintransgenicArabidopsisCol-0:哥伦比亚0型拟南芥;L1,L2,L3:pGWB17-GhPCBER过表达转基因株系1,2,3.*表示与黄酮含

图3-6转基因拟南芥中的木质素、木脂素、总黄酮含量测定Fig.3-6Determinationoflignin,lignanandtotalflavonoidsintransgenicArabidopsisCol-0:哥伦比亚0型拟南芥;L1,L2,L3:pGWB17-GhPCBER过表达转基因株系1,2,3.*表示与黄酮含

棉纤维木脂素的分离鉴定及其合成相关基因GhPCBER的功能初步分析.3.2.3转基因拟南芥植株木质素、木脂素、黄酮含量的测定在280nm的波长下测定不同浓度碱性木素标准品处理后的吸光度,然后以吸光纵坐标,以不同浓度的标准品为横坐标进行线性回归分析,得到木质素标准曲线回....


图3-7拟南芥苯丙烷代谢途径相关基因的表达Fig.3-7ExpressionofgenesrelatedtophenylpropanoidmetabolismpathwayinArabidopsisthalianaCol-0:哥伦比亚0型拟南;L1,L2,L3:pGWB17-GhPCBER过表达转基因株系1,2,3.*表示与对照相比差异显著(P<0.05),**表示与对照相比差异极显著(P<0.01).

图3-7拟南芥苯丙烷代谢途径相关基因的表达Fig.3-7ExpressionofgenesrelatedtophenylpropanoidmetabolismpathwayinArabidopsisthalianaCol-0:哥伦比亚0型拟南;L1,L2,L3:pGWB17-GhPCBER过表达转基因株系1,2,3.*表示与对照相比差异显著(P<0.05),**表示与对照相比差异极显著(P<0.01).

棉纤维木脂素的分离鉴定及其合成相关基因GhPCBER的功能初步分析.3.2.4转基因拟南芥植株苯丙烷代谢途径相关基因的qRT-PCR检测取GhPCBER过表达拟南芥叶片与茎,提取RNA并反转录为cDNA,通RT-PCR检测AtCCR、AtPSS、AtF3H....


图3-8GhPCBER基因沉默棉花株系的验证AB

图3-8GhPCBER基因沉默棉花株系的验证AB

棉纤维木脂素的分离鉴定及其合成相关基因GhPCBER的功能初步分析使用的pTRV1和pTRV2载体可用于棉花VIGS沉默研究。而注射pTRV2-GhPCBER和空载pTRV2(pTRV2-00)的棉花在表型上并无明显差异(如图3-8-A)。利用qRT-P....


图3-13Cas9-GhPCBER基因编辑棉花PCR验证Fig.3-13PCRvalidationofCas9-GhPCBERgeneeditingcotton

图3-13Cas9-GhPCBER基因编辑棉花PCR验证Fig.3-13PCRvalidationofCas9-GhPCBERgeneeditingcotton

棉纤维木脂素的分离鉴定及其合成相关基因GhPCBER的功能初步分析as9-GhPCBER重组质粒转化所得棉花幼苗叶片基因组DNA以,Cas9阳性对照,未转化的棉株DNA为阴性对照,以u6-7s、InfPCBE增验证。如图3检-1测3,到5株Cas9-GhPCBER基因....



本文编号:4058838

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