增强谷氨酸棒杆菌中底物供应及ido表达提高4-羟基异亮氨酸产量

发布时间：2025-07-21 19:13

　　4-羟基异亮氨酸（4-HIL）是一种极具潜力的糖尿病治疗药物。L-异亮氨酸双加氧酶（IDO）催化L-异亮氨酸（Ile）的C-4位发生羟基化形成4-HIL,同时α-酮戊二酸（α-KG）发生氧化并消耗氧气。在实验室前期研究中,将ido基因导入Ile生产菌Corynebacterium.glutamicum ssp.lactofermentum SN01中表达,实现了4-HIL的从头合成。本课题在ido表达菌株SN02的基础上,通过协同改善多底物的供应并提高IDO的活性,来提高4-HIL的产量。主要研究内容如下:（1）为了增强α-KG供应,分别表达异柠檬酸脱氢酶基因icd和敲除乙醛酸途径第一个基因aceA,获得菌株SZ08和SZ02。SZ08生长速率明显降低,4-HIL产量也下降,而SZ02中α-KG供应得到有效增强,4-HIL产量提高至69.47±2.18 mM,比出发菌株SN02的产量高18.9%,同时Ile合成得到加强,4-HIL与Ile的总量提高39.7%。（2）为了加强Ile供应,在aceA敲除菌中分别共表达ido-mqo和ido-lysC。所得菌株SZ03和SZ09的Ile浓度提高...

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图1-1(2S,3R,4S)-4-羟基异亮氨酸Fig.1-1(2S,3R,4S)-4-Hydroxyisoleucine

第一章绪论第一章绪论介源与结构4-hydroxyisoleucine,4-HIL）是一种非蛋.17。4-HIL首次发现于葫芦巴种子中，其芦巴种子主要分布于亚欧大陆和非洲大陆病的治疗药物[2]。在葫芦巴种子中，4-HI中（2S,3R,4S）-4-HIL是主要的药效活性....

图1-2IDO催化Ile生成4-HIL的反应Fig.1-2ConversionofIleinto4-HILcatalyzedbyIDO

图1-2IDO催化Ile生成4-HIL的反应Fig.1-2ConversionofIleinto4-HILcatalyzedbyIDO.2.4微生物发酵法微生物发酵法已被广泛应用于氨基酸、维生素、抗生素等物质的生产。根据目前的报道do可以在大肠....

图1-3重组谷氨酸棒杆菌中4-HIL的合成途径Fig.1-3Biosynthesispathwayof4-HILinrecombinantC.glutamicum在实验室前期工作中，通过过表达ppc，增强OAA的回补，4-HIL产量达到94.72mM[33]

图1-3重组谷氨酸棒杆菌中4-HIL的合成途径Fig.1-3Biosynthesispathwayof4-HILinrecombinantC.glutamicum实验室前期工作中，通过过表达ppc，增强OAA的回补，4-HIL产量达到94.72....

图2-1aceA敲除质粒构建图示

图2-1aceA敲除质粒构建图示Fig.2-1ConstructionofaceAdeletionplasmidpBS-ΔaceAceA敲除菌株的构建将aceA敲除质粒pBS-ΔaceA通过电击转入SN01感受态细胞中，涂布到含上，筛选可能与谷氨....

本文编号：4058254