慢性应激对大鼠海马神经元突触后膜谷氨酸AMPA受体的影响

发布时间：2017-10-22 05:33

  本文关键词：慢性应激对大鼠海马神经元突触后膜谷氨酸AMPA受体的影响

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【摘要】：目的:本研究围绕慢性应激是如何影响海马神经元突触后膜AMPA受体,进而导致海马空间认知功能的改变这一问题,从空间认知功能,血清皮质酮,谷氨酸能传递(AMPA受体亚基),及相关蛋白(PICK1、PSD-95)四方面,深入探讨慢性应激对海马突触后膜谷氨酸受体的影响。方法:雄性Sprague-Dawley大鼠48只,随机分配到对照组(n=16)、应激组(n=16)和恢复组(n=16),建立慢性不可预见性应激模型,并对恢复组大鼠在35天慢性应激后给予5周时间的自然恢复。应激模型和恢复模型结束后进行行为测试,考察大鼠海马空间学习和记忆功能的变化,行为实验包括旷场实验、巴恩斯迷宫实验。行为实验后,通过Elisa测量血清皮质酮含量;免疫组织化学方法检验谷氨酸AMPA受体亚基Glu A1,Glu A2,Glu A3在海马不同亚区的表达分布变化;并通过探索其相关蛋白PICK1和PSD-95的表达分布变化来探索其调节机制。结果:①从旷场试验的行为学结果和皮质酮检测的生理学结果显示,慢性应激模型建立成功,且在恢复期得到一定恢复。②从巴恩斯迷宫的行为学结果可知,慢性应激导致大鼠空间记忆的获得,保持,提取能力下降。对照组与恢复组在在巴恩斯迷宫学习阶段第三天比模型组相比显著减少。在测试阶段,对照组、恢复组在寻找洞数上显著多于模型组,且在目标洞区域重复寻找次数的模型组显著高于其他两组。③从皮质酮Elisa实验结果可知,慢性应激引起血清皮质酮含量上升,显著高于对照组和恢复组。④慢性应激对大鼠海马谷氨酸受体AMPA亚基产生影响,主要表现为模型组海马的Glu A1,Glu A2,Glu A3蛋白表达上升,显著高于对照组和恢复组。在不同海马分区,模型组海马的Glu A2,Glu A3和Glu A3均显著高于对照组,恢复组。模型组海马Glu A1在CA1区域、CA3区域与对照组恢复组差异不显著。⑤慢性应激对大鼠海马谷氨酸受体AMPA亚基相关蛋白的影响:模型组海马DG区,CA1区,CA3区,模型组PICK1蛋白表达显著高于对照组,恢复组。而对于PSD-95,三组蛋白表达水平没有显著差异。结论:①慢性应激导致的大鼠记忆和行为等空间认知能力障碍,可在应激源移除35天后得到恢复,表明慢性应激对大鼠认知能力的影响是可逆的。②大鼠血清皮质酮水平的变化表明,皮质酮在慢性应激过程中起着重要的调节作用,慢性应激对记忆和行为的影响与糖皮质激素的水平相关。③慢性应激条件下,大鼠海马谷氨酸AMPA受体及其亚基发生改变,表明AMPA受体蛋白表达水平的改变,是慢性应激通过改变海马结构,进而影响海马功能的重要机制。④慢性应激过程中,大鼠海马PICK1蛋白表达水平改变,说明PICK1蛋白表达可能调节谷氨酸AMPA受体功能重要的上游蛋白。⑤慢性应激可能通过糖皮质激素这条通路,影响海马神经元突触后膜AMPA受体和相关蛋白表达和功能,可逆的改变海马空间认知功能。
【关键词】：慢性应激 海马 AMPA受体 PICK1 PSD-95
【学位授予单位】：浙江理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：B845.1
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 图目录11-13
• 表目录13-14
• 引言14-15
• 1 文献综述15-22
• 1.1 应激与脑15-16
• 1.2 谷氨酸能神经传递16-19
• 1.2.1 谷氨酸16-17
• 1.2.2 AMPA型受体17-18
• 1.2.3 AMPA受体调节相关蛋白18-19
• 1.3 应激对谷氨酸能传递的影响19-21
• 1.4 海马与应激21-22
• 2 研究设计22-26
• 2.1 研究目的22
• 2.2 研究意义22
• 2.2.1 理论意义22
• 2.2.2 实践意义22
• 2.3 研究内容22-23
• 2.4 研究假设23
• 2.5 研究创新23-24
• 2.6 研究方法24-26
• 3 研究一：慢性应激对大鼠空间认知功能的影响26-33
• 3.1 材料和方法26-29
• 3.1.1 动物与分组26
• 3.1.2 设备及仪器26
• 3.1.3 实验试剂26-27
• 3.1.4 慢性应激模型27-28
• 3.1.5 旷场实验28
• 3.1.6 巴恩斯迷宫实验28-29
• 3.1.7 统计学处理29
• 3.2 结果29-31
• 3.21旷场实验结果29-30
• 3.2.2 巴恩斯迷宫实验30-31
• 3.3 讨论31-32
• 3.3.1 慢性应激模型31-32
• 3.3.2 慢性应激与空间认知能力32
• 3.4 小结32-33
• 4 研究二：慢性应激对大鼠血清皮质酮含量的影响33-36
• 4.1 材料与方法33-34
• 4.1.1 动物与分组33
• 4.1.2 仪器及设备33-34
• 4.1.3 药品及试剂34
• 4.1.4 酶联免疫吸附实验(ELISA) 测血清皮质酮34
• 4.1.5 统计学处理34
• 4.2 结果34-35
• 4.3 讨论35-36
• 5 研究三：慢性应激对海马谷氨酸AMPA受体的影响36-51
• 5.1 材料与方法36-40
• 5.1.1 动物及分组36
• 5.1.2 仪器及设备36-37
• 5.1.3 药品及试剂37-39
• 5.1.4 组织处理39
• 5.1.5 Western blotting检测39
• 5.1.6 免疫组化染色39-40
• 5.1.7 图像采集40
• 5.1.8 统计学处理40
• 5.2 结果40-48
• 5.2.1 免疫组化结果40-46
• 5.2.2 蛋白免疫印迹结果46-48
• 5.3 讨论48-51
• 6 研究四：慢性应激对海马谷氨酸 AMPA 受体相关蛋白的影响51-59
• 6.1 材料与方法51-52
• 6.1.1 动物及分组51
• 6.1.2 仪器及设备51
• 6.1.3 药品及试剂51
• 6.1.4 组织处理51
• 6.1.5 Western blotting检测51
• 6.1.6 免疫组化染色51
• 6.1.7 图像采集51-52
• 6.1.8 统计学处理52
• 6.2 结果52-57
• 6.2.1 免疫组化结果52-56
• 6.2.2 蛋白免疫印迹结果56-57
• 6.3 讨论57-59
• 6.3.1 慢性应激对PICK1蛋白表达的影响57-58
• 6.3.2 慢性应激对PSD-95蛋白表达的影响58-59
• 7 总讨论59-60
• 8 结论与展望60-61
• 8.1 研究结论60
• 8.2 展望与不足60-61
• 参考文献61-66
• 附录66-71
• 附录一66-67
• 附录二67-68
• 附录三68-71
• 致谢71

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 Ghulam Abbas;Sabira Naqvi;Shahab Mehmood;Nurul Kabir;Ahsana Dar;;强迫性游泳压力对大鼠单胺水平和神经退行性变化没有影响(英文)[J];Neuroscience Bulletin;2011年05期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 杨祥思;慢性应激对海马功能和结构的不对称影响[D];浙江理工大学;2013年

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本文编号：1076981