δ阿片肽DADLE对全脑缺血的神经保护及其自噬调控机制研究

发布时间：2025-05-27 05:12

　　在世界范围内,缺血性脑卒中逐渐成为了威胁人类生命健康的一大疾病,且临床上针对该疾病的治疗手段仍十分有限。近年来,围绕delta阿片受体(delta opioid receptor,DOR)对脑缺血的神经保护作用日益受到研究者的关注。本实验室前期研究结果表明,用[d-Ala2,d-Leu5]脑啡肽(DADLE,DOR激动剂)激活DOR可以显著减轻脑缺血损伤,对脑缺血引起的认知损伤有明显改善作用。此外,DOR活化可以改善脑缺血3天后神经元存活,促进星形胶质细胞活化,减少受损的星形胶质细胞。然而,DADLE激活DOR促进缺血神经元存活的具体机制却并不清楚。我们在体外研究中关注到,DADLE激活DOR通过促进自噬可以显著减轻星形胶质细胞糖氧剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)损伤。而近年来的研究报道均表明,自噬在脑缺血损伤中发挥重要的作用。其中,自噬启动相关的Unc-51样激酶(UNC-51 like kinase 1,ULK1)主要受到腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammali...

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1.2自噬过程和调控示意图[50]。营养不足、饥饿或缺血应激等情况会诱导自噬发生。Atg1复合物由ULK1、FIP200、Atg13和Atg101组成,受到上游信号调控启动自噬。随后,Atg1复合物激活由Beclin-1,Atg14,VSP15和VSP34组成的III类PI3K复合物,从而触发自噬小体成核和膜形成过程。随着Atg16L1和LC3-II参与膜伸长和融合,形成自噬小体。自噬小体与溶酶体融合形成自噬溶酶体,降解其中内容物,完成自噬过程。在营养丰富、生长因子和胰岛素信号的情况下,触发PI3K/Akt/mTORC1信号通路,抑制Atg1复合物的形成。

在哺乳动物细胞中,Unc-51样激酶(UNC-51likekinase1,ULK1)(酵母中为Atg1)、Atg13和FIP200形成ULK1蛋白激酶复合物,负责自噬的启动过程。Beclin-1(酵母中为Atg6)、液泡蛋白分选蛋白34(VPS34)和液泡蛋白分选蛋白15(....

图1.3 AMPK在脑缺血中的作用[93]。(A)AMPK抑制脑缺血损伤后的神经炎症。(B)AMPK减轻脑缺血损伤引起的氧化应激。(C)AMPK促进自噬减轻脑缺血损伤。(D)AMPK抑制谷氨酸释放,减轻兴奋性毒性。(E)AMPK改善脑缺血损伤引起的线粒体功能障碍。(F)AMPK抑制脑缺血损伤后的细胞凋亡。简而言之,AMPK通过调节上述机制帮助维持细胞能量稳态。

AMPK是生物能量代谢调节的关键分子,被称为“细胞能量感受器”[92]。同时,AMPK作为自噬的上游调控因子,通过对ULK1磷酸化影响下游自噬[59]。近年来随着研究深入,AMPK在脑缺血损伤中的神经保护作用逐渐明确起来。除了AMPK介导自噬之外,激活AMPK可以通过多种机制来减....

图1.4 DOR结构示意图[120]。DOR(橙色)包括一个细胞外氨基端区域,七个跨膜结构域以及一个细胞内羟基端区域。

阿片受体是一类抑制性G蛋白偶联受体,其配体为阿片类物质[116]。内源性阿片样物质包括强啡肽,脑啡肽,内啡肽,内吗啡肽和痛敏肽。阿片受体主要由3种亚型组成,即μ、κ、δ阿片受体(MOR,KOR,DOR)。阿片受体分布广泛,包括大脑、脊髓、外周神经元和消化道。除镇痛和成瘾外,阿片受....

图2.1动物实验简要流程示意图,包括侧脑室埋管、四血管阻断、给药和取样。

实验动物手术以及操作的简要流程参见图2.1。3.4.脑组织切片制备

本文编号：4047568