脂联素对心肌细胞缺氧/复氧损伤后AdipoR1、AdipoR2及T-cadherin表达的影响

发布时间：2025-06-04 06:05

　　第一部分脂联素受体在正常SD大鼠乳鼠心肌细胞的分布和表达 目的：研究脂联素受体1（AdipoR1）和脂联素受体2（AdipoR2）及T-钙黏蛋白（T-cadherin，T-cad），三种脂联素受体在大鼠乳鼠心肌细胞上的分布和表达。 方法： 1.利用酶消化法、差速贴壁法、化学试剂(5-brdu)抑制法培养原代的乳鼠心肌细胞，采用α-肌动蛋白细胞免疫荧光法对培养的心肌细胞进行鉴定，然后在倒置相差显微镜下观察细胞生长状态、细胞形态和其自发搏动。 2.选用原代培养72～96h的单层原代心肌细胞进行实验，采用RT-PCR和细胞免疫组织化学法检测AdipoR1、AdipoR2和T-cadherin的mRNA和蛋白的表达及分布。 结果： 1.经细胞免疫组织化学法鉴定培养的原代细胞为心肌细胞，且其纯度可达95%以上； 2.在SD大鼠乳鼠心肌细胞上均检测到了AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin的mRNA和蛋白表达，其中以AdipoR1和T-cadherin的mRNA和蛋白表达量高，与AdipoR2的表达量相比差异显著（P<0.01）。 结论： 1.脂联素受体1、脂联...

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【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
前言
第一部分 脂联素受体在正常 SD 大鼠乳鼠心肌细胞上的分布和表达
    1 材料与方法
        1.1 心肌细胞的培养
        1.2 鉴定心肌细胞
        1.3 正常单层细胞进行实验
        1.4 观察指标
        1.5 统计学处理
    结果
        1.6 细胞的形态特征、鉴定
        1.7 RT-PCR 检测 AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin 的 mRNA 表达结果
        1.8 免疫组织化学方法检测 AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin 的蛋白表达结果
    讨论
第二部分 脂联素对心肌细胞缺氧/复氧损伤后 AdipoR1、AdipoR2 及 T-cadherin 表达的影响
    2 材料与方法
        2.1 心肌细胞的培养
        2.2 乳鼠心室肌细胞的原代培养及鉴定
        2.3 实验分组情况
        2.4 观察指标和检测方法
        2.5 统计学处理
    结果
        2.6 倒置相差显微镜下细胞形态观察：
        2.7 各实验组细胞上清液中 LDH 释放量比较
        2.8 心肌细胞凋亡率
        2.9 TUNEL 法检测心肌细胞凋亡结果
        2.10 RT-PCR 检测 AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin 的 mRNA 表达
        2.11 Western blot 检测 AdipoR1、AdipoR2、T-cadherin 的蛋白表达
    讨论
结论
参考文献
附图
综述
    参考文献
个人简介
致谢



本文编号：4049427