重组厌氧芽胞梭菌eglA p-Her2/neu-IL12融合基因穿梭表达载体的构建

发布时间：2025-06-05 23:30

　　目的：构建重组厌氧芽胞梭菌saccharobutylicumβ-1,4葡聚糖内切酶启动子及信号肽(eglAp)-人表皮生长因子受体2胞外区(hHer2/neu ECD)-人白细胞介素12(rhIL12)融合基因穿梭表达载体(pIMPleglAp-hHer2/neu ECD-rhIL12),为进一步制备eglAp-hHer2/neu-rhIL 12融合基因修饰的重组厌氧芽胞梭菌,进行Her2/neu阳性实体肿瘤基因治疗的研究奠定基础。 方法：①以含有全长hHer2/neu序列的真核表达质粒(pcDNA3.1 hHer2/neu)为模板,采用PCR方法,扩增hHer2/neu ECD基因片段(1896bp),通过酶切连接的方法,将其插入重组rhIL12真核表达质粒pcDNA6 rhIL12 (p1)中的rhIL12基因上游,获得pcDNA6 hHer2/neu ECD-rhIL 12 (p2)真核表达质粒。②设计合成eglAp基因中一段55bp序列作为模板,通过连续PCR的方法,扩增eglAp基因片段(335bp),并构建T-eglAp(p3)亚克隆质粒。③通过酶切连接的方法,将eglA...

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
引言
第一章 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
第二章 结果
    2.1 hHer2/neu ECD基因的扩增和pcDNA6 hHer2/neu ECD-rhIL12质粒的构建及鉴定
    2.2 eglAp基因的获取及T-eglAp业克隆载体的构建
    2.3 pcDNA6 eglAp-hHer2/neu ECD-rhIL12真核表达质粒的构建
    2.4 eglAp-hHer2/neu ECD-rhIL12融合基因的扩增及重组pIMP1eglAp-hHer2/neuECD-rhIL12融合基因穿梭表达载体的构建及鉴定
第三章 讨论
第四章 小结
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间的研究成果
致谢



本文编号：4049441