周围神经Wallerian变性对干细胞归巢/迁移的动员作用及趋化性再生的潜在分子机制
发布时间:2025-07-09 01:42
目的在建立大鼠周围神经损伤模型的基础上,研究Wallerian变性与干细胞归巢之间的关系,周围神经损伤后干细胞向神经断端归巢的现象及潜在机制,以及干细胞归巢后的转归,为周围神经损伤的修复探索新的思路。利用蛋白组学技术建立感觉神经和运动神经的双向电泳(2-DE)图,比较周围感觉神经和运动神经内蛋白质的表达差异,为周围神经损伤后趋化性再生的机制研究提供依据。 方法1.使用PCR,Western blot,免疫荧光等方法鉴定趋化因子SDF-1在Wallerian变性的损伤神经远端及其特异性受体CXCR4在BMSCs中的表达情况。 2.用Transwell细胞迁移模型,检验离断后发生Wallerian变性的远端神经组织匀浆对BMSCs迁移的趋化作用,使用SDF-1/CXCR4轴特异性阻断剂AMD3100检验SDF-1在其中扮演的角色。 3.通过向大鼠坐骨神经切断/吻合模型的尾静脉注射移植表达RFP的BMSCs,模拟BMSCs向神经组织归巢的过程,使用荧光成像和病理学方法观察BMSCs是否通过机体血液循环归巢至损伤的神经组织局部,并进一步使用特异性阻断剂AMD3100验证SDF-...
【文章页数】:199 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
本文编号:4056946
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图1-1周围神经损伤Wallerian变性示意图
第一章引言的增殖等,并产生包括神经生长因子、脑源性神经营养因子等在内的多种细胞因子,这些分子的浓度梯度可吸引神经损伤后的再生的轴突向远端神经或靶器官生长[4],同时也可吸引参与神经修复的多种细胞的增殖和迁移(图1-1)。神经断裂后的24小时内,在细胞因子的作用下,所有远端....
图2-1大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)的体外培养及传代观察
图2-1大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)的体外培养及传代观察。A:全骨髓分离法大鼠BMSCs原代培养第6天(倒置显微镜×100);B:大鼠BMSCs传代至第3代第5天(倒置显微镜×100)。大鼠RFP-BMSCs在解冻接种4h后开始贴壁,24h后开始增殖,细胞集落增....
图2-2表达红色荧光蛋白大鼠骨髓基质细胞(RFP-BMSCs)的体外培养及传代观察
图2-1大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)的体外培养及传代观察。A:全骨髓分离法大鼠BMSCs原代培养第6天(倒置显微镜×100);B:大鼠BMSCs传代至第3代第5天(倒置显微镜×100)。大鼠RFP-BMSCs在解冻接种4h后开始贴壁,24h后开始增殖,细胞集落增....
图2-3流式细胞仪(FCM)检测BMSCs表面标志物
第二章骨髓间充质干细胞的体外培养、鉴定和CXCR4的表达2.4.2大鼠BMSCs/RPF-BMSCs的流式细胞仪检测结果流式细胞仪检测BMSCs表面标志,其中造血干细胞表面标志物CD11b(2.43%)、CD45(1.64%)表达阴性,而基质细胞表面标志物CD....
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