食线虫真菌的保存及部分菌种分子学鉴定研究

发布时间：2025-08-12 18:35

　　食线虫真菌是动植物寄生线虫重要的生防菌株。本选题的目的是对不同种属的食线虫真菌的保存方法进行研究探讨,在多个菌种短期和长期保存中,寻求一种或者多种较好的保存方法,可以保持或提高菌株的存活能力,并且同时可以保持良好的捕食效果,此后,对在之前从中国采样分离的12株菌株的ITS序列进行扩增、测序后,对这些分离株的序列进行系统进化分析,研究其同其他相似菌株的亲缘关系,对这12株分离株进行鉴定。其研究内容如下:采用2%麸皮浸出液琼脂斜面保存、土壤干燥保存、硅胶粒脱脂牛奶保存、改良的硅胶粒吸附保存、冰冻保存(-18℃和-80℃)6种保存方式保存分离株,6个月后检查其存活和捕食效果。结果显示,各种方式保存6个月的分离株存活率分别为100%,94.12%,96.43%,95.56%,88.89%,70.37%,捕食率分别为87.31%,77.08%,81.48%,97.67%,75.00%,63.16%。其中试管斜面保存的存活效果最好,硅胶粒脱脂牛奶保存次之。改良的硅胶粒吸附保存的捕食效果最佳,试管斜面保存次之。采用试管斜面法、冷冻保存法(-18℃和-80℃)、真空冷冻干燥、改良硅胶粒吸附法、土壤干燥法...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图2-1采用不同方法保存的菌株

将β-环状糊精加入蒸馏水中制作成饱和浓度的液体,高压灭菌后备用。将待保存的菌株接种于1%CMA平皿中间,在25℃环境中培养10d。在培养皿中加入5mL已经灭菌的β环状糊精液体,然后使用无菌手术刀将试验菌株的菌丝孢子培养物和β环状糊精液混合均匀,β环状糊精在此作为保护剂使用,将....

图2-2平皿培养的真菌

菌株样品存活后,在平皿中加入捻转血矛线虫L3,作用24h后观察捕食情况,若有捕食并且产生捕食结构,则表示样品仍具有捕食能力。2.1.7保存捕食线虫性真菌分离株的体外捕杀线虫效果的检查

图2-3利用双平皿法和贝尔曼法进行体外试验

培养14d后,按照Cai等(2017)[72]描述的方法用贝尔曼装置将双平皿培养法中小平皿中粪便培养物和大平皿中液体中的全部幼虫进行分离,收集试验组和对照组平皿中的L3。并用下面公式计算试验组的杀虫率:2.1.8数据处理

图2-4-18℃冷冻保存菌株对捻转血矛线虫L3的捕食效果

真菌在用四种不同的方法保存3年后,经过绵羊粪便体外试验后仍旧具有良好的捕食效果。经冷冻保存(-18℃和-80℃)、真空冷冻干燥保存和试管斜面保存的菌株对绵羊粪便中捻转血矛线虫L3体外杀虫试验,结果如下图所示。由图2-4可知,-18℃冷冻保存的4株菌株可显著减少捻转血矛线虫L3(P....

本文编号：4058962