兔骨髓间充质干细胞培养、冻存及体外分化为胰岛β细胞的研究

发布时间：2025-08-12 16:56

　　糖尿病作为严重危害人类健康的一类代谢性疾病，世界上患病人口逐年增多。胰岛移植可以治疗糖尿病，却面临着供体缺乏和移植免疫排斥问题，细胞替代治疗的可行性显著。研究发现，胚胎干细胞（ESCs）、诱导多潜能干细胞（iPS）以及成体干细胞（AS）可以体内、外诱导分化为胰岛素分泌细胞，分化细胞可改善、逆转糖尿病动物的高血糖症，为移植细胞替代治疗糖尿病提供了可能性。骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）是存在于骨髓腔内非造血干细胞类的成体干细胞，可以避免利用胚胎干细胞涉及的伦理问题和诱导性干细胞所产生的技术性问题。如何诱导BM-MSCs稳定、高效地分化为功能完全的胰岛β细胞是目前亟待解决的问题。本试验拟在体外分离培养兔BM-MSCs的基础上，对冻存细胞的增殖能力、生物学特性进行鉴定，优化并建立稳定的兔BM-MSCs体外定向分化为胰岛β细胞的诱导方法与技术体系。 1.采用红细胞裂解液法分离获取兔骨髓间充质干细胞（BM-MSCs），基于其贴附塑料基质细胞培养板生长的特性体外扩增培养。通过观察形态学，鉴定细胞表面标志，描绘生长曲线等了解兔BM-MSCs生物学特性。红细胞裂解液法操作简便、便于复制，能够分离获...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1原代细胞培养24h，少量细胞贴壁生长（×20）

图1原代细胞培养24h，少量细胞贴壁生长（×20）Fig.1Primarycellswereculturedfor24hwithsmalladheredcells（×20图2原代细胞生长48h，排列无序多呈三角形、梭形（×20）ulturedpr....

图2原代细胞生长48h，排列无序多呈三角形、梭形（×20）

起初，P1-P5代骨髓间充质干细胞生长速度快，瓶底。P7-P9代细胞增殖变慢，10-12d长满瓶底。细胞生1:3的比例传代培养，则贴壁细胞生长数少或成不规则的弱，同时伴有细胞崩解、死亡，见图5。图1原代细胞培养24h，少量细胞贴壁生长（×20）Fig.1P....

图3原代细胞生长7d,排列规则有序呈漩涡状生长（×20）

图1原代细胞培养24h，少量细胞贴壁生长（×20）Fig.1Primarycellswereculturedfor24hwithsmalladheredcells（×20图2原代细胞生长48h，排列无序多呈三角形、梭形（×20）ulturedpr....

图4P3代细胞排列有序，呈漩涡状生长（×20）

图4P3代细胞排列有序，呈漩涡状生长（×20）Fig.4P3cellswerespiralwithorganizedcellarrangements（×20）细胞不规则形态，胞质中出现颗粒，折光性弱，伴有细胞崩解、死ereirregularshape,....

本文编号：4058843