蛋白质自噬性降解在ALS疾病中的作用及海藻糖对ALS转基因鼠的干预研究

发布时间：2025-05-12 19:44

　　第一部分：海藻糖对过表达ALS相关毒性蛋白质NSC-34细胞的干预研究 目的：本研究中，我们采用过表达ALS疾病相关蛋白质的细胞为模型观察海藻糖对这些毒性蛋白质的自噬性降解有无促进作用，并观察其能否减轻这些蛋白质对细胞带来的毒性作用。为探索自噬调控对ALS病理的影响提供体外实验依据。 方法：用瞬时转染的方法在NSC-34细胞系中过表达WT TDP-43，与家族型ALS相关的Q331K TDP-43，M337V TDP-43突变蛋白质，TDP-43的C末端片段TDP-25和TDP-35，以及人WT SOD1和人突变型SOD1-G93A蛋白质。再给予用不同浓度的海藻糖（25mM、50mM和100mM）进行干预。用免疫印迹法检测LC3-II及P62这两种自噬通路的标记分子以及各种疾病相关蛋白质的表达。观察海藻糖对各类细胞的过表达蛋白质是否有促进清除的作用。并应用自噬通路的特异性阻断剂3-MA和wortmannin来进一步验证海藻糖的促蛋白质降解作用机制是否在自噬通路上。应用自噬通路中自噬体和溶酶体的融合的阻断剂bafilomycin A1来明确海藻糖的对LC3-II的上调作用机制。...

【文章页数】：108 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
英文缩写
引言
第一部分 海藻糖对过表达 ALS 相关毒性蛋白质 NSC-34 细胞的干预研究
    前言
    材料与方法
    结果
    附图
    讨论
    小结
    参考文献
第二部分 海藻糖对 ALS 转基因小鼠突变 SOD1 的自噬性降解及炎症反应的干预研究
    前言
    材料与方法
    结果
    附图
    讨论
    小结
    参考文献
第三部分 海藻糖对 ALS 转基因小鼠病程进展及行为学的干预研究
    前言
    材料与方法
    结果
    附图
    附表
    讨论
    小结
    参考文献
结论
综述 自噬调控在神经变性病中的研究进展
    参考文献
致谢
个人简历



本文编号：4045143