CD147与CAML在恶性黑素瘤细胞中的相互作用研究

发布时间：2025-05-13 03:27

　　研究目的： CD147是一种属于免疫球蛋白超家族的跨膜糖蛋白,本实验组前期研究表明CD147能促进恶性黑素瘤侵袭、转移、增殖和血管新生,但具体机制还不十分清楚。钙离子信号调节亲环素配体(calcium-modulating cyclophilin ligand, CAML)是定位于线粒体的跨膜蛋白,能调节胞内钙离子浓度,本研究拟通过对CD147与CAML在恶性黑素瘤细胞株A375中相互作用的研究,明确其相互作用的位点,在细胞中的定位及对胞内钙离子的影响,为进一步揭示恶性黑素瘤发生发展的分子机制提供理论依据。 研究方法： 1.以CD147为诱饵,运用酵母双杂交技术筛选人胚脑细胞文库,以寻求与其相互作用的蛋白。 2.构建CAML与CD147全长及缺失突变体的真核表达载体。 3.运用免疫共沉淀(co-IP)验证CD147与CAML相互结合,同时共转染CAML质粒及CD147的不同缺失突变体质粒至工具细胞293T, co-IP分析CD147与CAML相互结合的位点。 4.运用细胞免疫荧光方法观察A375细胞中CD147与CAML的定位,同时在A375细胞中共转...

【文章页数】：61 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
目录
缩略表
前言
1 材料方法
    1.1 材料
        1.1.1 试剂
        1.1.2 主要耗材
        1.1.3 主要仪器
        1.1.4 主要自制溶液配方
        1.1.5 细胞株
    1.2 方法
        1.2.1 分子克隆
        1.2.2 酵母双杂交
        1.2.3 细胞培养
        1.2.4 免疫共沉淀及免疫印迹
        1.2.5 细胞免疫荧光
        1.2.6 胞内钙离子检测
2 结果
    2.1 体外实验证实CD147-CAML相结合
    2.2 CD147通过跨膜段与CAML结合
    2.3 免疫荧光显示CD147与CAML共定位
    2.4 CD147与胞浆内钙离子及MMP的关系
3 讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
获奖、参与课题及发表文章情况
致谢



本文编号：4045668