siRNA化学修饰位点特异性的机理研究

发布时间：2025-05-28 04:13

　　siRNA由于其自身特有的沉默基因的作用而被广泛应用于基因功能研究和药物开发中。在临床运用中，人们必须对siRNA进行化学修饰以克服天然siRNA本身在血清稳定性以及脱靶效应等方面的局限性。但化学修饰也是把双刃剑，虽然修饰后的siRNA在血清稳定性等方面得到了显著提高，但却往往会降低沉默基因的活性。如何合理地修饰才能使siRNA在提高血清稳定性的同时又不丧失活性是这个领域的一个挑战，而这个问题的本质是缺乏对siRNA化学修饰与活性两者间关系的机理的阐释。虽然之前有不少科研人员做过这方面的尝试，但是都没有得到系统的、完善的解决方法。基于这个问题对siRNA制药领域的重要性，我们针对siRNA化学修饰位点与活性两者间的关系进行了系统的研究和分析。 为了探究siRNA的化学修饰所在位点与活性的关系，本研究对两条siRNA的反义链2-19位的核苷酸依次进行单核苷2’-OMe修饰并检测各自的活性。发现siRNA的反义链的不同位点对于2’-OMe修饰的容忍性各不相同，这暗示着siRNA中存在着化学修饰位点特异性的现象。而且我们发现14位点对2’-OMe修饰的容忍性最差，而该位点在之前文献中并没...

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【部分图文】：

图1-2Argonaute蛋白家族的系统发育树

图1-2Argonaute蛋白家族的系统发育树[88]。黑色的线表示Argonaute-like亚家族，绿色的线表示PIWI-like亚家族，红色的线表示C.elegans-specificgroup3亚家族。1.2.2Argonaute蛋白的结构AG....

图1-3人类AGO2蛋白的晶体结构

来[100]。MID结构域呈现“Rossmann-like”的折叠形式[100]，有一个小RNA5’末端的结合口袋可以将小RNA锚定在Ago蛋白上[90,101-103]，此外还有一个潜在的靶mRNA5’-m7G帽子的结合位点[104]。PIWI结构域的折叠....

图1-5AGO蛋白家族在siRNA，miRNA，piRNA三种小RNA的生成以及功能发挥的过程中扮演着重要的角色[88]

北京大学博士研究生学位论文siRNA化学修饰位点特异性的机理研究1.2.3Argonaute蛋白与小RNA的装载AGO蛋白有识别小RNA3....

图1-5miRNA发挥基因沉默作用示意图

图1-5miRNA发挥基因沉默作用示意图[88]。miRNA在靶标mRNA翻译起始和翻译延伸两个阶段发挥功能。3）AGO蛋白在piRNA通路中的作用piRNA的生成需要PIWI-like亚家族的参与。与siRNA，miRNA不同，piRNA的生成并不....

本文编号：4048059