U0126通过抑制MAPK/ERK信号通路修复脊髓损伤的实验研究

发布时间：2025-05-27 01:20

　　目的脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是神经元细胞的轴突临时或永久性的损伤,如脊髓的正常运动、感觉、或自主神经功能的损伤,从而导致严重的神经系统功能紊乱。目前,大多数正在研究的治疗脊髓损伤的方法都旨在减少脊髓损伤相关的症状以及促进功能性神经纤维的再生。Ras/Raf/ERK1/2信号通路是与细胞生存、生长、增殖和死亡相关的主要细胞内信号通路,越来越多的证据表明这条信号通路在中枢和外周神经系统中发挥着重要的作用,例如树突和轴突的形成以及神经元极性的形成等。因此,本研究通过建立脊髓损伤细胞模型以及小鼠脊髓损伤模型从体外实验和体内实验两部分来验证Ras/Raf/ERK1/2信号通路抑制剂U0126在脊髓损伤后的修复作用及其可能的作用机制。方法体外实验采用NYU IMPACTOR MODEL-Ⅱ脊髓打击器制作C57BL/6J小鼠脊髓损伤动物模型,在此基础上建立脊髓损伤细胞模型(SCI组),术后1周选取脊髓损伤部位进行分离培养脊髓损伤后运动神经元细胞,对照组采用出生1天的幼鼠培养脊髓运动神经元细胞。通过电镜及免疫荧光方法鉴定脊髓运动神经元细胞,并鉴别损伤前后细胞的差异。通过W...

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、U0126抑制ERK通路修复脊髓损伤的体外研究
    1.1 对象和方法
        1.1.1 实验材料和器材
        1.1.2 脊髓运动神经元培养
        1.1.3 脊髓损伤细胞模型的制备
        1.1.4 小鼠脊髓动物模型制备
        1.1.5 神经元细胞的免疫荧光鉴定
        1.1.6 免疫印迹实验（Western blot）
        1.1.7 细胞迁移实验
        1.1.8 细胞粘附实验
        1.1.9 轴突树突染色（DiL）
    1.2 结果
        1.2.1 细胞形态学及鉴定
        1.2.2 免疫印迹实验（Western blot）
        1.2.3 细胞迁移实验
        1.2.4 细胞粘附实验
        1.2.5 轴突树突染色（DiL）
    1.3 讨论
        1.3.1 脊髓损伤后兴奋性和抑制性突触之间的平衡关系
        1.3.2 细胞迁移和粘附在脊髓损伤后及修复过程中的作用
        1.3.3 树突棘的形态和数目与脊髓损伤后神经修复之间的关系
    1.4 小结
二、U0126抑制ERK通路修复脊髓损伤的体内研究
    2.1 对象和方法
        2.1.1 实验材料和器械
        2.1.2 实验动物分组
        2.1.3 运动功能评分（BMS评分）
        2.1.4 脊髓标本的取材与包埋
        2.1.5 免疫组织化学染色
    2.2 结果
        2.2.1 后肢运动功能评分（BMS评分）
        2.2.2 免疫组织化学染色
    2.3 讨论
        2.3.1 脊髓损伤动物模型及损伤后的运动学评分
        2.3.2 Ras/Raf/ERK1/2 信号通路抑制后在脊髓损伤修复中的作用
    2.4 小结
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
附录
综述 脊髓损伤中相关信号通路的研究进展
    综述参考文献
致谢
个人简历



本文编号：4047279