高盐刺激可诱导巨噬细胞极化从而促进肾脏成纤维细胞的增殖及表型转化

发布时间：2025-06-27 23:36

　　 目的探讨高盐诱导单核巨噬细胞极化,以及极化后巨噬细胞对肾脏纤维细胞株(NRK-49F)增殖及表型转化的影响。方法培养大鼠骨髓单核巨噬细胞及NRK-49F,随后予以高盐(Na+161 mmol/L)刺激单核巨噬细胞2 h。采用RT-qPCR检测M0、M1、M2各型巨噬细胞表面标记物,同时分别收集正常及高盐组巨噬细胞培养基,予以RT-qPCR及Elisa分别检测培养基中IL-6及TGF-β的mRNA表达与蛋白表达。随后建立巨噬细胞与NRK-49F的Transwell小室共培养体系。采用EdU及Transwell分别检测NRK-49F增殖及迁移能力。予以Western blot检测NRK-49F中collagen I、collagen III及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)相对表达情况。结果 RT-qPCR结果显示,与对照组相比,高盐组细胞中表达M2型巨噬细胞表面标记物甘露糖受体(MR)和精氨酸酶(Arg)基因的mRNA水平显著升高(P<0.05)。EdU及Transwell结果显示,共培养体系中,高盐处理巨噬细胞组上层NRK-49F增殖、迁移能力增强(P<0.05)。West...

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【部分图文】：

图1 免疫荧光鉴定M0巨噬细胞表面标记物F4/F80

巨噬细胞经原代分离培养后为M0型巨噬细胞，以F4/80作为表面标记行免疫荧光染色，如（图1）所示，95%以上的细胞均表达F4/80，为绿色荧光，进一步证实培养单核巨噬细胞成功；M1型巨噬细胞由于其具有促进炎的作用，因此高表达炎症相关基因IL-1β、TNF-α；M2型巨噬细胞具有强....

图2.巨噬细胞表面标记物MR基因m RNA相对水平

RT-qPCR结果显示（图10），高盐组细胞培养液中IL-6与TGF-βmRNA均显著高于正常组表达（P<0.05）。Elisa结果显示（表2），与正常组相比，高盐组细胞培养液中IL-6与TGF-β1分泌量显著增高（P<0.05）。图3巨噬细胞表面标记物Arg基因mRNA....

图3 巨噬细胞表面标记物Arg基因m RNA相对水平

图2.巨噬细胞表面标记物MR基因mRNA相对水平3讨论

图4 巨噬细胞表面标记物IL-1β基因m RNA相对水平

高血压所致的肾脏损伤引起肾脏纤维化的机制十分复杂，包括免疫炎症反应，氧化应激、神经内分泌调节等[14-15]。其中，在免疫炎症反应中，巨噬细胞浸润、极化并分泌多种炎症介质及细胞因子是导致肾脏纤维化的重要原因[16-17]。研究表明，在患病人群及动物模型的肾小球及肾小管间质中均可见....

本文编号：4054067