TET2在低剪切应力诱导HUVECs焦亡中的作用及其机制研究

发布时间：2025-06-27 23:46

　　低剪切应力诱导血管内皮细胞(Vascular endothelial cells,VECs)炎症是动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)的重要环节,但其具体调控机制尚不明确。新近研究提示,焦亡(炎性程序性细胞死亡)是剪切应力敏感的生物学过程并贯穿As病变进程。前期研究表明DNA羟甲基化酶TET2为剪切应力敏感基因,低剪切应力负性调控TET2的表达,但低剪切应力与As间的关系以及TET2在低剪切应力诱导As中的作用及其调控机制尚不清楚。目的:探讨TET2在低剪切应力诱导HUVECs焦亡中的作用及其机制。方法:1、采用平行平板流动腔系统,细胞水平观察低剪切应力和生理剪切应力下人脐静脉血管内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)焦亡相关蛋白Caspase1、GSDMD、NLRP3、IL-1β以及TET2的表达水平;2、采用慢病毒转染技术,构建低表达TET2 HUVECs细胞株,免疫荧光和Western blotting检测其转染效率;3、免疫荧光检测TET2 shRNA对细胞焦亡相关蛋白Caspase1的表达水平;We...

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
主要缩略语中英文索引
第1章 绪论
第2章 实验材料与研究方法
    2.1 实验材料与仪器
        2.1.1 实验所用细胞和试剂
        2.1.2 主要仪器设备
    2.2 主要试剂的配制
    2.3 实验方法
        2.3.1 细胞培养
        2.3.2 慢病毒感染贴壁细胞
        2.3.3 蛋白质免疫印迹
        2.3.4 ATP含量测定
        2.3.5 细胞线粒体膜电位检测(JC-1)
        2.3.6 细胞免疫荧光
        2.3.7 透射电镜
        2.3.8 平行平板流动腔系统
        2.3.9 活性氧(ROS)荧光探针-DHE检测
        2.3.10 统计学方法
第3章 实验结果
    3.1 低剪切应力上调HUVECS焦亡相关蛋白的表达
    3.2 低剪切应力下调TET2的表达
    3.3 构建低表达TET2细胞株
    3.4 TET2 shRNA对HUVECs形态的影响
    3.5 TET2 shRNA上调HUVECS焦亡相关蛋白Caspase1的表达
    3.6 TET2 shRNA上调HUVECs焦亡相关蛋白的表达
    3.7 TET2 shRNA对HUVECs线粒体形态的影响
    3.8 TET2 shRNA对HUVECs线粒体功能的影响
        3.8.1 TET2 shRNA抑制线粒体ATP的合成
        3.8.2 TET2 shRNA诱导HUVECs线粒体膜电位异常
        3.8.3 TET2 shRNA上调HUVECs线粒体ROS生成
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
文献综述
    References
作者攻读硕士学位期间的科研成果
基金资助
致谢



本文编号：4054081