脊髓康通过IRE1-XBP1通路抑制内质网应激诱导的PC12细胞凋亡

发布时间：2025-06-27 02:39

　　 目的基于IRE1-XBP1通路探究脊髓康(JSK)抑制内质网应激(ERS)诱导的PC12细胞凋亡的作用及机制。方法利用神经生长因子(NGF)诱导PC12细胞为神经元样细胞并通过流式细胞技术鉴定;诱导后细胞分为空白组(无干预措施)、模型组[2μmol/L毒胡萝卜素(TG)]、脊髓康组(2μmol/L TG及0.0521 g/mL JSK水提物冻干粉,合生药0.625 g/mL);CCK8法检测各组细胞24、48、72 h增殖活性,流式细胞技术检测各组细胞凋亡状态,Western Blot与q-PCR检测1型内质网转膜蛋白激酶(IRE1)、X盒结合蛋白1(XBP1)、葡萄糖调节蛋白78(Grp78)及C/EBP同源蛋白(CHOP)的蛋白及mRNA表达情况,透射电镜扫描各组细胞观察细胞及内质网形态学特征。结果与空白组比较,模型组NGF诱导的神经元样PC12细胞增殖活性显著降低(P<0.05),晚期凋亡明显增高(P<0.01),电镜扫描显示其细胞粗面内质网结构肿胀,囊泡化,呈典型的细胞凋亡形态;Grp78、CHOP蛋白表达显著升高(P<0.05),XBP1及IRE1蛋白表达也...

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【部分图文】：

图1 PC12细胞及NGF诱导分化后的神经元样细胞

使用倒置显微镜观察经NGF培养7天后的PC12细胞,可见PC12细胞胞体呈三角形、梭形,突起较前明显变长,贴壁样生长,已具有神经元样形态。使用流式细胞测定MAP2和NSE表达阳性率,结果显示MAP2平均阳性率为(62.54±1.00)%,NSE平均阳性率为(93.32±2.87)....

图2 MAP2和NSE表达的阳性率

与空白组比较,模型组24、48、72hOD值均降低(P<0.01);与模型组比较,JSK干预24、48、72h后OD值均显著增高(P<0.05)。图3各组CCK8检测神经元样PC12细胞的OD值比较

图3 各组CCK8检测神经元样PC12细胞的OD值比较

图2MAP2和NSE表达的阳性率3各组PC12细胞凋亡情况比较(图4)

图4 各组神经元样PC12凋亡率比较

与空白组比较,模型组细胞的晚期凋亡率明显增高(P<0.01),与模型组比较,JSK干预PC12细胞后晚期凋亡率及早期凋亡率均明显降低(P<0.05,P<0.01)。4各组神经元样PC12细胞XBP1、IRE1、Grp78、CHOP蛋白表达比较(图5)

本文编号：4053674