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C1GALT1稳定过表达人胃癌细胞株的构建及其生物学特性的初步观察

发布时间:2025-05-01 09:48
  目的:构建C1GALT1稳定过表达的MGC-803人胃癌细胞株,观察其生物学特性,旨在探讨C1GALT1基因过表达对人胃癌细胞株体外增殖、迁移、侵袭能力及细胞周期的影响。方法:以人胃癌MGC803细胞株为研究对象,构建pHBLV-CMV-EF1-Zsgreen1-T2A-puro-h-C1GALT1慢病毒包装载体,包装慢病毒,感染MGC803细胞,Puromycin筛选过表达h-C1GALT1的MGC-803细胞株,运用Realtime PCR法及Western-blot法检测C1GALT1 mRNA和C1GALT1蛋白的表达情况,以转染空载体的胃癌细胞株为对照,CCK8法检测C1GALT1过表达对胃癌细胞株MGC-803增殖能力的影响,划痕实验分析对胃癌细胞株的迁移能力影响,Transwell实验分析对胃癌细胞株侵袭能力的影响,流式细胞术检测细胞周期的变化。结果:1、扩大培养后,运用有限稀释法最终挑取出MGC803-C1GALT1-1、MGC803-C1GALT1-2、MGC803-C1GALT1-3三株细胞。2、Realtime PCR法检测到h-C1GALT1在MGC803细胞中有...

【文章页数】:57 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
主要英文缩略语索引
第1章 绪论
第2章 材料与方法
    2.1 实验材料
    2.2 实验方法
第3章 实验结果
    3.1 h-C1GALT1 过表达慢病毒载体的构建
    3.2 pHBLV-CMV-EF1-Zsgreen1-T2A-puro-h-C1GALT1 慢病毒载体的转染
    3.3 Realtime PCR法检测h-C1GALT1 表达结果
    3.4 Western-blot法检测h-C1GALT1 表达结果
    3.5 细胞增殖实验结果
    3.6 细胞迁移实验结果
    3.7 细胞侵袭实验结果
    3.8 流式细胞术实验结果
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
文献综述
    参考文献
致谢



本文编号:4042070

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