基于荧光素光催化氧化酶活性的信号放大策略检测肿瘤标志物

发布时间：2025-05-13 04:39

　　血清碱性磷酸酶（ALP）是与前列腺癌、骨骼、肝功能障碍、糖尿病等多种疾病密切相关的重要生物标志物。它还是一种功能酶,能够将对应底物去磷酸化,即通过水解磷酸酯键将底物分子上的磷酸基团转换为磷酸根离子和羟基。血清甲胎蛋白（AFP）是诊断原发性肝癌的特异性血清标志物。由于这些肿瘤标志物的具有重要医学意义,开发快速、灵敏的AFP检测方法具有重要意义。荧光素是一种高效的小分子模拟酶,在可见光下可以迅速的催化3,3′,5,5′-四甲基联苯胺（TMB）氧化,发生显色反应。本文通过改变荧光素的官能团、合成配合物纳米颗粒（CNPs）以及构建金属有机框架免疫复合物等策略调控荧光素的光催化酶活性,实现了血清中ALP和AFP的检测。该方法检测线性范围广、特异性好、仪器设备简单,为临床医学提供了前景。此外,该方法不仅证明了荧光素光催化活性与其分子结构密切相关,某些金属离子(如Cu²⁺)能够抑制其酶活性。揭示Cu²⁺抑制荧光素模拟酶活性的机理为酶活性抑制剂的筛选提供了思路。研究内容有以下几个方面:（1）基于荧光素的光诱导氧化酶活性比色检测ALP和AFP本文选取荧光素二磷酸...

【文章页数】：82 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
缩写符号对照表
第1章 绪论
    1.1 肿瘤标志物概述
    1.2 肿瘤标志物的检测方法
        1.2.1 化学发光免疫分析
        1.2.2 酶联免疫吸附实验
        1.2.3 免疫传感器
    1.3 肿瘤标志物的检测信号
    1.4 目标信号放大策略
    1.5 背景信号降低策略
    1.6 本论文的研究内容及意义
第2章 基于荧光素的光诱导氧化酶活性比色检测ALP和 AFP
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 试剂与仪器
        2.2.2 缓冲溶液和抗体溶液的配制
        2.2.3 ALP活性的检测
        2.2.4 AFP活性测定
        2.2.5 临床血清样本的获取与处理
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 比色检测ALP的可行性
        2.3.2 反应条件优化
        2.3.3 ALP的检测性能
        2.3.4 ALP检测的选择性
        2.3.5 比色免疫检测AFP的分析性能
        2.3.6 人血清样品中AFP的测定
    2.4 结论
第3章 基于双锁策略减少背景信号高灵敏检测ALP和 AFP
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 试剂与仪器
        3.2.2 Ce-FDP CNPs的制备
        3.2.3 ALP活性的检测
        3.2.4 AFP的免疫分析
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 Ce-FDP CNPs的制备与表征
        3.3.2 ALP传感的可行性
        3.3.3 优化反应条件
        3.3.4 ALP的分析性能
        3.3.5 AFP传感原理及测试性能
        3.3.6 人血清样品中AFP的检测
    3.4 结论
第4章 双功能抗体及铜有机框架纳米复合材料用于超灵敏检测AFP
    4.1 引言
    4.2 实验部分
        4.2.1 试剂与仪器
        4.2.2 Cu²⁺抑制荧光素的光诱导氧化酶活性
        4.2.3 电子自旋共振(EPR)实验
        4.2.4 Cu-MOF的制备
        4.2.5 Ab2@Cu-MOF制备
        4.2.6 基于Ab2@Cu-MOF检测AFP
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 用Cu²⁺调控荧光素的光诱导氧化酶活性及其机制探究
        4.3.2 Cu²⁺检测性能
        4.3.3 Cu-MOF和 Ab2@Cu-MOF的设计原理和表征
        4.3.4 Ab2@Cu-MOF免疫法检测AFP的性能和选择性
        4.3.5 测定人血清样品中的AFP
    4.4 结论
第5章 全文总结与展望
    5.1 全文总结
    5.2 展望
参考文献
硕士期间已发表的研究成果
致谢



本文编号：4045759