TNFAIP1通过阻遏CSNK2B依赖性的NF-κB通路抑制肝癌的发展

发布时间：2025-06-04 04:49

　　肝癌(HCC)已成为全球第二大癌症相关的死亡病因,根据2015年全国癌症统计分析,肝癌占国内恶性肿瘤发病率的五分之一,已成为严重威胁我国人民健康和生命的一大杀手。据统计,90%以上的肝癌是原发性肝癌,可由慢性乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、酗酒、或与糖尿病和肥胖相关的代谢性疾病所诱发。手术切除,肝移植,放疗及药物化疗是目前治疗肝癌的常见方式,而手术切除仍是治疗肝癌最有效的手段。但是由于肝癌的高转移潜能和肿瘤新生血管的侵犯,临床上只有不足20%的患者能行手术切除,并且肝癌的高复发性又导致患者术后5年的生存率不到30%,这一现象是目前困扰临床治疗的一大难题。研究认为肝癌的高转移性和异常激活的血管生成,是导致肝癌患者术后易复发及低生存率的主要原因。因此研究阐明调控肝癌转移和异常血管新生的原因及探究肝癌治疗新的靶点,是目前急需解决的问题,同时也具有非常重要的意义。肿瘤坏死因子α诱导蛋白1(TNFAIP1),又称B12或BACURD2,是一种可由TNF-α或LPS诱导的蛋白,在参与肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移、DNA合成、免疫、神经元发育和阿尔兹海默疾病中,起重要的调控作用。然而,T...

【文章页数】：134 页

【学位级别】：博士

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摘要
ABSTRACT
1.前言
2 实验材料和方法
    2.1 实验材料与试剂
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 实验试剂
    2.2 仪器与设备
    2.3 实验方法
        2.3.1 病人组织样本
        2.3.2 实验动物
        2.3.3 细胞培养、冻存和复苏
        2.3.4 质粒构建及质粒提取
        2.3.5 细胞转染
        2.3.6 构建稳转细胞系
        2.3.7 RNA提取和荧光定量PCR(RT-qPCR)
        2.3.8 Western blot分析
        2.3.9 免疫组化和评分
        2.3.10 苏木精-伊红(HE)染色
        2.3.11 免疫荧光
        2.3.12 免疫共沉淀
        2.3.13 液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)
        2.3.14 蛋白质纯化和GST-pull down
        2.3.15 泛素化分析
        2.3.16 细胞增殖和TUNEL分析
        2.3.17 Trans well分析
        2.3.18 血管生成实验
        2.3.19 肺转移实验
        2.3.20 裸鼠成瘤实验
        2.3.21 统计分析
3 结果与分析
    3.1 TNFAIP1 在肝癌组织中低表达
    3.2 TNFAIP1 在肝癌转移组织和肝癌细胞中低表达
    3.3 TNFAIP1 抑制肝癌细胞增殖和成瘤
    3.4 TNFAIP1 促进肝癌细胞凋亡
    3.5 TNFAIP1 抑制肝癌细胞的迁移、侵袭和转移
    3.6 TNFAIP1 下调与细胞增殖,迁移和侵袭相关基因的表达
    3.7 TNFAIP1 抑制肝癌血管生成
    3.8 TNFAIP1 下调血管内皮生长因子(VEGF)的表达
    3.9 TNFAIP1 通过阻断NF-κB的转录活性抑制肝癌的进展
    3.10 .TNFAIP1与CSNK2B相互作用,促进其泛素介导的降解,抑制CSNK2B依赖的NF-κB转录激活
        3.10.1 TNFAIP1与CSNK2B存在相互作用
        3.10.2 CSNK2B促进NF-κB通路的转录激活
        3.10.3 TNFAIP1 下调CSNK2B的表达
        3.10.4 TNFAIP1-Cul3 复合物促进CSNK2B泛素介导的降解
        3.10.5 TNFAIP1 下调CSNK2B抑制NF-κB通路
    3.11 .过表达CSNK2B逆转TNFAIP1 对肝癌的作用
    3.12 临床肝癌标本中TNFAIP1与CSNK2B的相关性分析
4 讨论
参考文献
攻读博士学位期间已发表的学术论文目录
英文缩写表
致谢



本文编号：4049336