PVY侵染对烟草过氧化物酶体自噬的调控研究

发布时间：2025-07-09 00:30

　　细胞自噬参与抵抗营养不足、疾病和衰老等过程,在此过程中一些错误折叠的蛋白质及受损的细胞器会被分解,降解后的成分得以循环利用。本研究以细胞自噬作为研究的切入点,重点围绕马铃薯Y病毒（Potato virus Y,PVY）侵染烟草能够引起细胞自噬及过氧化物酶体自噬开展了一系列研究。为验证PVY侵染是否激活寄主细胞自噬,本研究以PVY、PVY-GFP-S和Nb-CFP-ATG8f转基因植株为研究材料,以PVY侵染烟草为处理,以等量的PBS处理为对照,通过激光共聚焦显微镜观察到PVY侵染烟草后有发光的自噬小体,且数量显著高于对照,暗示PVY侵染烟草可以引起细胞自噬;为进一步验证PVY侵染寄主可以引起细胞自噬,利用Western Blot检测细胞自噬分子marker ATG8蛋白表达,结果表明PVY侵染烟草可以提高寄主ATG8蛋白含量;利用TEM进一步观察了PVY侵染对烟草细胞病理学的影响,结果显示PVY侵染烟草可以引起胞内过氧化物酶体中减少、叶绿体及淀粉粒的变化、自噬体在液泡降解等;为进一步验证细胞自噬对PVY侵染复制的影响,利用基因沉默自噬基因ATG6和ATG7,烟草叶片的PVY-GFP荧光面...

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.1自噬小泡的形成(KlionskyDJ，2005)

（Autophagy-relatedgene,ATG），这些基因的编码产物参与到自噬小泡形成的各个过程，包括自噬的诱导、小泡的成核、延伸、成熟及与液泡的融合等，这个过程中有多种自噬相关基因的参与(图1.1)（Klionsky,2005）。在植物细胞自噬的过程中，存在种潜在....

图2.1PVY侵染细胞自噬标记转基因植株Nb-CFP-ATG8f中ATG8-CFP的表达变化

最后用丙酮脱水。（4）在37℃条件下，包埋剂与丙酮混合液浸泡叶片1h，纯包埋处理过夜，获得样品制（5）将样片制品置于透射电镜（TEM）下进行观察。2.2.8激光共聚焦显微镜观察PVY-GFP-S侵染性克隆侵润转基因烟草Nb-CFP-ATG8f48h后，取接种叶片....

图2.2PVY侵染烟草后诱发寄主产生细胞自噬A:PBS处理转基因烟草Nb-CFP-ATG8f，B-F:PVY处理转基因烟草Nb-CFP-ATG8f

中国农业科学院硕士学位论文第二章PVY侵染引起细理组，对照组使用等量的PBS处理，利用TEM观察PVY-GFP-S侵染细胞噬标记转基Nb-CFP-ATG8f的细胞病理学特征，结果表明(图2.2)，PVY侵染转基因烟草Nb-CFP-ATG8f在叶片细胞中发现双层膜的自噬体结....

图2.3PVY侵染对烟草ATG8含量变化分析

科学院硕士学位论文第二章自噬标记蛋白ATG8的含量变化情况，结果如图2.3所示，与PBS处理8h，烟草叶片中ATG8蛋白含量升高，3-MA与PVY侵染混合处理的叶导剂ConA处理和仅PVY侵染的样品，也低于仅PBS处理的对照；CATG8的含量均高于对照和处理样品；而单PV....

本文编号：4056856