抑癌性microRNA介导中药养正散结汤调控胃癌细胞生长机制的研究

发布时间：2025-07-19 02:20

　　目的:微小RNA(microRNA,miRNA)是一类小分子非编码RNA,它通过调控目标基因表达水平参与到多种生理、病理过程。miRNA在肿瘤发生发展中通过扮演癌基因或抑癌基因角色发挥着重要作用。课题组前期研究发现中药复方养正散结汤能显著抑制胃癌细胞的增殖、促进其凋亡。本研究拟在此基础上,进一步探索养正散结汤对胃癌细胞miRNA的影响,以及抑癌性miRNA介导养正散结汤发挥抑癌作用的潜在分子机制。方法:1.miRNA芯片检测经养正散结汤含药血清处理后SGC-7901细胞的miRNA表达谱,与对照组比较。2.筛选出代表性抑癌性miRNA let-7a和miR-7,利用q RT-PCR法在AGS、SGC-7901、HS-746T、MKN-45细胞中验证养正散结汤含药血清对其表达影响。3.利用miRNA mimic及inhibitor过表达或抑制miR-7表达,cck-8法检测其对胃癌细胞AGS和MKN-45细胞增殖的影响,划痕愈合实验检测其对胃癌细胞AGS迁移的影响。4.WB检测经养正散结汤含药血清和对照组处理后let-7a靶标c-Myc、Ras的表达,miR-7靶标EGFR的表达,比较两组...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１中药组及对照组ＲＮＡ质量??

组及对照组Ａ表达差异情选出差异表达下图：??

图2经养正散结汤处理后表达下调的miRNA

１?２??謂??Ｈ??图１中药组及对照组ＲＮＡ质量??表中药组，２代表对照组。??经养正散结汤处理后ｍｉＲＮＡ表达差异情况??原始数据的分析，我们筛选出差异表达倍数彡１．?５的ｍｉＲＮＡ，其ｍｉＲＮ中药组及对照组的结果如下图：??．－

图１中药组及对照组ＲＮＡ质量??注：１代表中药组，２代表对照组

１?２??謂??Ｈ??图１中药组及对照组ＲＮＡ质量??表中药组，２代表对照组。??经养正散结汤处理后ｍｉＲＮＡ表达差异情况??原始数据的分析，我们筛选出差异表达倍数彡１．?５的ｍｉＲＮＡ，其ｍｉＲＮ中药组及对照组的结果如下图：??．－

图４?ｕ６、ｌｅｔ－７ａ、ｍｉＲ－７的扩增曲线及熔解曲线??注：Ａ：ｕ６、ｌｅｔ－７ａ、ｍｉＲ－７扩增曲线；Ｂ：ｕ６熔解曲线；Ｃ：ｌｅｔ－７ａ７的熔解曲线；Ｄ：ｍｉＲ－７的熔解??曲线??

运用ｑ?ＲＴ－ＰＣＲ检测ｌｅｔ－７ａ、ｍｉＲ－７在胃癌细胞中经养正散结汤含药血清及对照组??中的表达差异，以ｕ６?ｓｎＲＮＡ作为内参。根据扩增曲线可见，ｕ６、ｌｅｔ－７ａ、ｍｉＲ－７基因??扩增曲线为典型的倒Ｓ型曲线（见图４Ａ），提示ｌｅｔ－７ａ与ｍｉＲ－７得到有效扩增，扩增效?....

本文编号：4057828