早期液体复苏治疗对严重脓毒症大鼠肠道微生态的影响研究

发布时间：2025-06-04 03:43

　　目的:探讨研究早期液体复苏治疗及早期液体复苏联合免疫调节治疗对严重脓毒症大鼠肠道微生态的影响,揭示早期液体复苏治疗及早期液体复苏联合免疫调节治疗对严重脓毒症的疗效机理,以及对严重脓毒症大鼠肠道微生态影响的机制,为阐明严重脓毒症的发生发展机制提供理论依据,为探索严重脓毒症治疗方案的优化奠定基础。方法:随机将80只(200-250g)SD雄性大鼠分成5组:假手术组(Sham),严重脓毒症组(CLP),液体复苏组(NS),环磷酰胺组(CTX),液体复苏联合环磷酰胺组(NS+CTX)。采用盲肠结扎穿孔术(Cecal ligation and puncture,[CLP])复制严重脓毒症模型,假手术组给予同样的手术操作,但不进行穿孔及结扎。判断及鉴定严重脓毒症模型复制成功后,通过腹腔注射生理盐水(30ml/kg)及环磷酰胺(10mg/kg)干预治疗。记录各组大鼠存活时间及数量并绘制生存曲线,定量分析各组大鼠生存率。通过荧光示踪法检测各组大鼠门静脉血中FD-70浓度,定量分析各组大鼠肠道通透性。通过各组大鼠空肠组织切片HE染色,观察各组大鼠肠道组织损伤程度及炎性浸润情况;并利用TUNEL法,定性及定...

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

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前言
    1.脓毒症治疗研究现状及进展
    2.肠道微生态
    3.肠道微生态与脓毒症的发生发展机制
材料与方法
    1. 材料
        1.1 实验动物
        1.2 主要购买的试剂及公司
        1.3 主要仪器设备、耗材及公司
        1.4 外科手术器械
        1.5 主要配制的试剂
    2. 方法
        2.1 严重脓毒症大鼠模型的复制、鉴定、实验分组及生存率计算
            2.1.1 实验动物分组
            2.1.2 术前准备
            2.1.3 模型制备
            2.1.4 模型鉴定
            2.1.5 脓毒症大鼠干预药物注射
        2.2 血液及组织标本的获取
            2.2.1 组织蜡块包埋
            2.2.2 检测动脉血气
        2.3 大鼠血清炎症因子检测
            2.3.1 准备试剂
            2.3.2 检测程序
            2.3.3 结果计算与判断
        2.4 组织蛋白的提取
        2.5 利用Western Blot技术检测肠道组织Occludin的表达
            2.5.1SDS－PAGE电泳
            2.5.2 转膜
            2.5.3 免疫反应
            2.5.4 图像分析
        2.6 肠道组织病理切片
        2.7 TUNEL检测肠上皮细胞凋亡(TUNEL凋亡检测试剂盒)
        2.8 肠道通透性测定
        2.9 实验结果整理分析，数据采集与统计学分析
    3.技术路线
结果
    3.1 大鼠基本情况
    3.2 大鼠七天生存分析情况
    3.3 各组大鼠紧密连接蛋白表达情况
    3.4 早期液体复苏和环磷酰胺对严重脓毒症后肠上皮细胞凋亡的影响
    3.5 各组大鼠肠组织病理学检测
    3.6 各组大鼠炎症因子TNF - a、IL - 6、IL - 10 的表达水平
    3.7 各组大鼠肠壁通透性检测
    3.8 各组大鼠肠绒毛膜长度改变
    3.9 各组大鼠动脉血气分析情况
讨论
结论
参考文献
文献综述
    参考文献
致谢
作者简介
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本文编号：4049258