应用 15 N同位素研究长牡蛎中麻痹性贝类毒素（PSTs）的代谢
发布时间：2025-05-27 00:47
赤潮中有害毒藻会产生多种海洋毒素,其中有着广泛分布的麻痹性贝类毒素（Paralytic Shellfish Toxins,PSTs）可以经各营养级之间的食物关系累积于海洋动物中,若经消化吸收进入人体,会与细胞膜Na+离子通道结合阻碍神经传导,引起麻痹性中毒,从而对人类造成亚致死或致死作用。作为近海养殖的主要经济物种,双壳贝类需要过滤大量海水摄食藻类,从而将有毒藻中的毒素累积在体内,是PSTs传递的主要媒介。本文以甲藻Alexandrium minutum作为毒素生产者,首先,研究暴露于纳米颗粒（nanoparticles,NPs）时A.minutum的生长情况、生理状态和产毒状况;然后将A.minutum进行稳定同位素15N多代培养标记,比较藻和毒素中的标记丰度,以及标记藻是否同普通藻一样可以在磷缺乏时保持生长;最后以长牡蛎（Crassostrea gigas）作为毒素蓄积对象,将15N-PSTs引入到贝类体内,研究15N-PSTs在贝体内的分布和转化情况,通过对染毒前后长牡蛎内脏团进行非靶向代谢组学...
【文章页数】：98 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
1 绪论
1.1 麻痹性贝毒的研究概况
1.1.1 麻痹性贝毒的来源及分类
1.1.2 麻痹性贝毒的检测方式
1.1.3 影响产毒藻生长和产毒的因素
1.1.4 麻痹性贝毒的蓄积及代谢研究
1.2 稳定同位素示踪法的应用概况
1.2.1 稳定同位素示踪法简介
1.2.2 15N稳定同位素示踪法应用及进展
1.3 代谢组学的应用
1.4 研究目的、意义及内容
1.4.1 研究目的及意义
1.4.2 主要研究内容
2 纳米颗粒(NPs)对A.minutum生长、氧化应激和产毒的影响
2.1 引言
2.2 材料与仪器
2.2.1 原料
2.2.2 主要试剂
2.2.3 主要仪器
2.3 实验方法
2.3.1 培养条件
2.3.2 活性氧(ROS)的测定
2.3.3 丙二醛(MDA)的测定
2.3.4 超氧化物歧化酶(SOD)的测定
2.3.5 过氧化氢酶(CAT)的测定
2.3.6 藻中PSTs的提取
2.3.7 PSTs的检测
2.4 结果与分析
2.4.1 NPs对 A.minutum生长的影响
2.4.2 A.minutum的氧化应激状况
2.4.3 NPs对 A.minutum产毒状况的影响
2.5 本章小结
3 长牡蛎不同组织中15N-PSTs的蓄积及转化
3.1 引言
3.2 材料与仪器
3.2.1 原料
3.2.2 主要试剂
3.2.3 主要仪器
3.3 实验方法
3.3.1 高丰度15N-A.minutum的培养
3.3.2 15N-标记丰度的测定
3.3.3 15N-PSTs在牡蛎内的蓄积实验
3.3.4 鳃的HE染色观察
3.3.5 牡蛎组织中15N-PSTs的提取及测定
3.4 结果与分析
3.4.1 高丰度15N-A.minutum的驯养及磷缺乏对其生长的影响
3.4.2 牡蛎的摄食情况
3.4.3 染毒前后长牡蛎的组织学观察
3.4.4 15N-PSTs蓄积含量和种类
3.4.5 15N-PSTs在牡蛎内的转化规律
3.5 本章小结
4 长牡蛎染15N-PSTs前后的代谢组学分析
4.1 引言
4.2 材料与仪器
4.2.1 原料
4.2.2 主要试剂
4.2.3 主要仪器
4.3 实验方法
4.3.1 15N-PSTs在牡蛎内的蓄积实验
4.3.2 代谢组学样品的前处理
4.3.3 液相色谱-质谱分析条件
4.3.4 数据处理
4.4 结果与分析
4.4.1 检测方法的可行性
4.4.2 差异代谢物的筛选
4.4.3 牡蛎染毒前后的代谢通路分析
4.5 本章小结
结论与展望
主要结论
展望
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文
本文编号：4047244
【文章页数】：98 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
1 绪论
1.1 麻痹性贝毒的研究概况
1.1.1 麻痹性贝毒的来源及分类
1.1.2 麻痹性贝毒的检测方式
1.1.3 影响产毒藻生长和产毒的因素
1.1.4 麻痹性贝毒的蓄积及代谢研究
1.2 稳定同位素示踪法的应用概况
1.2.1 稳定同位素示踪法简介
1.2.2 15N稳定同位素示踪法应用及进展
1.3 代谢组学的应用
1.4 研究目的、意义及内容
1.4.1 研究目的及意义
1.4.2 主要研究内容
2 纳米颗粒(NPs)对A.minutum生长、氧化应激和产毒的影响
2.1 引言
2.2 材料与仪器
2.2.1 原料
2.2.2 主要试剂
2.2.3 主要仪器
2.3 实验方法
2.3.1 培养条件
2.3.2 活性氧(ROS)的测定
2.3.3 丙二醛(MDA)的测定
2.3.4 超氧化物歧化酶(SOD)的测定
2.3.5 过氧化氢酶(CAT)的测定
2.3.6 藻中PSTs的提取
2.3.7 PSTs的检测
2.4 结果与分析
2.4.1 NPs对 A.minutum生长的影响
2.4.2 A.minutum的氧化应激状况
2.4.3 NPs对 A.minutum产毒状况的影响
2.5 本章小结
3 长牡蛎不同组织中15N-PSTs的蓄积及转化
3.1 引言
3.2 材料与仪器
3.2.1 原料
3.2.2 主要试剂
3.2.3 主要仪器
3.3 实验方法
3.3.1 高丰度15N-A.minutum的培养
3.3.2 15N-标记丰度的测定
3.3.3 15N-PSTs在牡蛎内的蓄积实验
3.3.4 鳃的HE染色观察
3.3.5 牡蛎组织中15N-PSTs的提取及测定
3.4 结果与分析
3.4.1 高丰度15N-A.minutum的驯养及磷缺乏对其生长的影响
3.4.2 牡蛎的摄食情况
3.4.3 染毒前后长牡蛎的组织学观察
3.4.4 15N-PSTs蓄积含量和种类
3.4.5 15N-PSTs在牡蛎内的转化规律
3.5 本章小结
4 长牡蛎染15N-PSTs前后的代谢组学分析
4.1 引言
4.2 材料与仪器
4.2.1 原料
4.2.2 主要试剂
4.2.3 主要仪器
4.3 实验方法
4.3.1 15N-PSTs在牡蛎内的蓄积实验
4.3.2 代谢组学样品的前处理
4.3.3 液相色谱-质谱分析条件
4.3.4 数据处理
4.4 结果与分析
4.4.1 检测方法的可行性
4.4.2 差异代谢物的筛选
4.4.3 牡蛎染毒前后的代谢通路分析
4.5 本章小结
结论与展望
主要结论
展望
参考文献
致谢
攻读学位期间发表的学术论文
本文编号：4047244
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